申请/专利权人：江苏硕世生物科技股份有限公司;浙江省疾病预防控制中心(浙江省公共卫生研究院)

申请日：2024-03-26

公开（公告）日：2024-06-25

公开（公告）号：CN117947199B

主分类号：C12Q1/6893

分类号：C12Q1/6893;C12Q1/6848;C12N15/11;G01N33/543;G01N33/569;G01N33/58;C12R1/90

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.25#授权;2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开

摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于区分疟原虫虫种的引物组合及试剂盒，本发明根据恶性疟、间日疟、卵形疟和三日疟特异性核酸序列设计4条特异性上游环引物，采用环介导等温扩增体系，完成PCR扩增；同时为了解决免疫胶体金无法通过检测富组氨酸蛋白‑2（HRP2）或者乳酸脱氢酶（pLDH）进行分型和传统LAMP依靠是否有副产物沉淀来判断病原体的有无，亦无法进行虫种鉴别的问题，本发明结合胶体金层析和LAMP技术，将检测4种疟原虫特异性核酸序列转换成检测标记在特异性引物上的荧光素，从而实现高灵敏度的可视化疟原虫鉴别分型。

主权项：1.一种用于区分疟原虫虫种的引物组合，所述疟原虫包括恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫、三日疟原虫中的至少一种，其特征在于，所述引物组合包括：疟原虫通用外侧引物：F3:5’-CGGAAACCTTGTTACGAC-3’，如SEQIDNo.1所示；B3:5’-GCAATTATTAATCTTGAACGAGGA-3’，如SEQIDNo.2所示；疟原虫通用内侧引物：FIP:5’-TTGAAAGATATGATGAATTG-TTCCTTTAAAAGATAGGATTTAC-3’，如SEQIDNo.3所示；BIP:5’-CGGTAGGAGCGACGGGC-GCCTAGTAAGCATGATTC-3’，如SEQIDNo.4所示；疟原虫通用下游环引物：LB:5’-AAGGGCAGGGACGTAGTCAGC-3’，如SEQIDNo.5所示；恶性疟原虫特异性上游环引物：pf-LF:5’-GAAAAATTGAATTATATTCTTTTT-3’，如SEQIDNo.6所示；间日疟原虫特异性上游环引物：pv-LF:5’-GAAGGGGGATTATATCTCCTTT-3’，如SEQIDNo.7所示；卵形疟原虫特异性上游环引物：po-LF:5’-CCAGAAAAAAGAAAATATAATTTTCCCTTT-3’，如SEQIDNo.8所示；三日疟原虫特异性上游环引物：pm-LF:5’-AAAAAGGGTTTTTATTCTTTTTTC-3’，如SEQIDNo.9所示。

全文数据：

权利要求：

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