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一种DNA串联重复序列的合成方法 

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申请/专利权人:天津大学

摘要:本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种DNA串联重复序列的合成方法。本发明通过对目标DNA片段进行分析、拆分后,在拆分单元两侧加入特定序列获得组装单元的序列,利用GoldenGate对组装单元进行组装,实现了DNA串联重复序列的人工合成。同时通过编写python代码RepeatsAssembly,使得这一过程自动化进行。该方法大大提高了合成串联重复序列的效率,为人工合成染色体中特殊区域如着丝粒区域提供了可行的方法,为自动化合成DNA序列以及合成整个染色体基因组奠定了基础。

主权项:1.一种DNA串联重复序列的合成方法,其特征在于,包括:步骤1:分析目标DNA串联重复序列,确定重复单元的长度;步骤2:根据所述重复单元的长度确定所述DNA串联重复序列中所有的拆分位点,所述拆分位点以黏性末端表示;其中,每个拆分位点,即每两个相邻重复单元的黏性末端,由以下方法查找获得:1)、将两个相邻的重复单元定义为S1和S2,S1和S2的长度为m; 寻找S1和S2之间的差异位点,找到长度为k的黏性末端: ,,;2)、选择长度为2k的黏性末端区间,计算每个kbp黏性末端的汉明距离,得到汉明距离最大的kbp的序列作为黏性末端,当存在多个相同汉明距离时随机选择,获取黏性末端: 3)、所述步骤2)中已经获得的黏性末端在后续黏性末端的查找中不会再重复获取;4)、将所述黏性末端分配给所述两个相邻的重复单元S1和S2,获得拆分单元1和拆分单元2;5)、按照步骤1)~4)的方法,获得所述DNA串联重复序列中所有的拆分单元;步骤3:将步骤2获得的拆分单元进行分组,将每组中的每个拆分单元两侧加入特殊碱基序列,获得组装单元;所述加入的特殊碱基序列包括限制性内切酶II的保护碱基及识别序列、切割间隔碱基、限制性内切酶IIS的反向识别序列和保护碱基;步骤4:合成所述组装单元,组装,获得DNA串联重复序列。

全文数据:

权利要求:

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