申请/专利权人：大连博源医学科技有限公司

申请日：2022-12-29

公开（公告）日：2024-06-25

公开（公告）号：CN115980223B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.25#授权;2023.05.05#实质审查的生效;2023.04.18#公开

摘要：本发明公开了一种用于检测血液中11‑脱氢血栓烷B211dhTxB2的液相色谱‑串联质谱方法，步骤如下：血液样本加入酸化剂调节pH后孵育一段时间，再加入内标，然后经液液萃取对11dhTxB2进行除杂、纯化和富集，使用液相色谱‑串联质谱LC‑MSMS对样本提取液进行分析，以保留时间和离子丰度比为定性依据，采用同位素内标法建立校准曲线进行定量，实现对血液中11dhTxB2浓度的精准检测。本发明还公开了一种用于检测血液中11‑脱氢血栓烷B211dhTxB2的试剂盒，包括萃取液、内标液、校准液、稀释液、酸化剂、复溶液和质控样本。

主权项：1.一种使用试剂盒检测血液中11-脱氢血栓烷B211dhTxB2的液相色谱-串联质谱LC-MSMS方法，其特征在于，所述试剂盒组成包括：萃取液、内标液、校准液、稀释液、酸化剂、复溶液和质控样本；所述血液为血清或血浆；所述萃取液为体积比1:2:1的乙酸乙酯、叔丁基甲醚和正己烷；所述校准液为用乙腈配制的9个不同浓度的溶液，浓度范围为0.5～100ngmL；所述内标液为10ngmL的11dhTxB2-d4溶液；所述稀释液为PBS溶液；所述酸化剂为浓度为0.4molL盐酸水溶液；所述复溶液为按体积比计含3％甲酸的甲醇；检测方法包括以下步骤：1200μL血液样本加入100μL酸化剂，平衡20min；2经酸化的血液样本于35℃孵育3h，加入20μL内标液混匀，震荡5分钟；3孵育后的血液样本加入1mL萃取液，震荡10分钟，离心，取上清液于40℃下氮气吹干，加入100μL复溶液复溶；4将步骤3得到的复溶液，采用液相色谱-串联质谱进行分析，通过校准液建立的校准曲线计算血液样本中11-脱氢血栓烷B211dhTxB2的含量；其中，步骤4中的色谱条件：色谱柱：Waters，CortecsT3；柱温：40℃；进样室温度：10℃；进样量：5μL；流动相A：5mmolL甲酸铵的水溶液，流动相B：乙腈溶液；梯度洗脱条件： 质谱条件：离子化模式：ESI-；喷雾电压：-4500V；温度：500℃；雾化气GS1：55psi；辅助雾化气GS2：55psi；气帘气：30psi；扫描方式：多反应检测MRM； 注：*为定量离子。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 大连博源医学科技有限公司 一种用于检测血液中11-脱氢血栓烷B₂的液相色谱-串联质谱方法和试剂盒

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