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在三倍体毛白杨中开展高效基因编辑的方法 

申请/专利权人:北京林业大学

申请日:2023-10-09

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256551A

主分类号:C12N15/84

分类号:C12N15/84;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/00

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明属于植物基因工程领域,公开了一种在三倍体毛白杨中开展高效基因编辑的方法。包括如下步骤:1通过分析基因组结构特点,设计精准的gRNA,合成引物;2利用BsaI酶,再通过无缝克隆的方法将靶向目标基因的gRNA构建到基因编辑载体上;3原生质体中进行基因编辑效率的验证;4高效遗传转化和基因编辑,具体包括如下步骤:准备遗传转化的植株;将构建好的载体转化到农杆菌EHA105中;制备侵染重悬液:重悬液中加入石墨烯溶液;侵染三倍体毛白杨;侵染叶片和农杆菌的共同培养;抗性愈伤筛选;抗性芽的诱导、伸长、生根培养;5利用分子检测技术对基因编辑效率进行检测。本发明建立了高效基因编辑技术体系。

主权项:1.一种在三倍体毛白杨中开展高效基因编辑的方法,其特征在于,包括如下步骤:1通过分析基因组结构特点,设计精准的gRNA,合成引物;2利用BsaI酶,再通过无缝克隆的方法将靶向目标基因的gRNA构建到基因编辑载体上;3原生质体中进行基因编辑效率的验证;4高效遗传转化和基因编辑,具体包括如下步骤:准备遗传转化的植株;将构建好的载体转化到农杆菌EHA105中;制备侵染重悬液:重悬液中加入石墨烯溶液;侵染三倍体毛白杨;侵染叶片和农杆菌的共同培养;抗性愈伤筛选;抗性芽的诱导、伸长、生根培养;5利用分子检测技术对基因编辑效率进行检测。

全文数据:

权利要求:

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