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申请/专利权人：浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司;浙江理工大学
申请日：2024-04-03
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN118256537A
主分类号：C12N15/70
分类号：C12N15/70;C12N15/113;C12R1/19
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.28#公开
摘要：本发明公开的是一种环状RNA在大肠杆菌体内精确合成的设计及制备方法，设计4种目的片段，将上述4种目的片段分别连接至II型内含子D1和D6之间，得到4种环状RNA的编码DNA序列，插入T7启动子序列，得到4种环状RNA的编码DNA分子，将四种片段分别插入到pET28a载体的XhoI及BglII位点之间，得到的重组质粒，转化至感受态细胞中，经筛选培养诱导后，利用酚氯仿进行裂解抽提，得到目的RNA粗提物，本发明具有可灵活、高效地生产多种片段长度及不同序列的环状RNA，且生产的环状RNA具有与体外合成环状RNA相当的荧光表达能力等技术特点。
主权项：1.一种环状RNA在大肠杆菌体内精确合成的设计及制备方法,其特征在于，所述环状RNA包括四种目的片段：c1700、c1400、c500、c64，其中，c1700的片段为随机序列；c1400的片段被设计用于荧光检测，首先将IRES序列分为两段，反向拼接于GFP序列两端，生成一个ES-GFP-IR的序列；c500的片段是从IRES序列中选取；c64的环状序列是由一个23bp的双链和两端各9bp的茎环组成。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司;浙江理工大学 一种环状RNA在大肠杆菌体内精确合成的设计及制备方法
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