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一种鉴定梨早期糖积累量的KASP分子标记的引物组及应用 

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申请/专利权人:上海市农业科学院;上海科立特农科(集团)有限公司

摘要:本发明公开了一种用于鉴定梨早期糖积累量的KASP分子标记的引物组及应用,属于分子标记辅助育种技术领域,利用梨基因组的两个SNP位点分别开发了两组KASP分子标记qTang1和qTang2,其中,qTang1分子标记的引物组具有如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的核苷酸序列;qTang2分子标记的引物组具有如SEQIDNO.4、SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示的核苷酸序列。本发明中的分子标记引物组可用于筛选7月初高糖早熟的砂梨品种,提高育种效率,促进了梨种植业的发展。

主权项:1.一种鉴定梨早期糖积累量的方法,其特征在于,包含如下步骤:1)采集待测梨样品的幼嫩叶片,提取基因组DNA;2)以待测梨样品的DNA为模板,利用qTang1分子标记的引物组、qTang2分子标记的引物组分别进行PCR扩增;3)检测PCR扩增产物的荧光值,其中,由qTang1分子标记的引物组扩增的PCR产物中,仅有FAM荧光值或FAM和HEX混合型荧光值代表早期糖积累量高的基因型,产物仅有HEX荧光值代表早期糖积累量低的基因型;由qTang2分子标记的引物组扩增的PCR产物中,有FAM荧光值或FAM和HEX混合型荧光值代表早期糖积累量低的基因型,产物仅有HEX荧光值时代表早期糖积累量高的基因型;其中,所述步骤2)中的PCR扩增,其扩增体系总体积为10μL,包括1μL的浓度为10ngμL的DNA模板、5μL的2XMasterMix、2μL的引物组合物、2μL的双蒸水;其中,所述qTang1分子标记的引物组为:核苷酸序列如SEQIDNO.1所示的正向引物qTang1-FAM,如SEQIDNO.2所示的正向引物qTang1-HEX和如SEQIDNO.3所示的反向引物qTang1-R;所述qTang2分子标记的引物组为:核苷酸序列如SEQIDNO.4所示的正向引物qTang2-F,如SEQIDNO.5所示的反向引物qTang2-FAM和如SEQIDNO.6所示反向引物qTang2-HEX;所述qTang1的引物组合物为0.5μL的qTang1-FAM、0.5μL的qTang1-HEX和1μL的qTang1-R;所述qTang2的引物组合物为1μL的qTang2-F、0.5μL的qTang2-FAM和0.5μL的qTang2-HEX,其中,所有的引物浓度均为10mM。

全文数据:

权利要求:

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