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申请/专利权人：福州国重生物科技有限公司
摘要：本发明涉及表达和纯化重组人源壳多糖酶3样蛋白1的方法。具体地，制备CHI3L1蛋白的方法步骤如下：合成CHI3L1基因，接着通过采用XhoI和AgeI双酶切位点亚克隆至pHL‑sec质粒中，得到pHL‑sec‑CHI3L1‑6His表达质粒，转入DH5α感受态，通过测序确定后，提取质粒；使冻存的HEK‑293F细胞复苏，然后对该细胞进行传代，接着以PEI包裹质粒对细胞进行转染，培养细胞以获得培养液；使用Ni‑NTA柱将经转染所得细胞培养液上清进行纯化和浓缩，获得重组人源壳多糖酶3样蛋白1。本发明还涉及使用镍柱表达和纯化CHI3L1蛋白的方法。本发明方法能够以高的收率获得高纯度CHI3L1蛋白。
主权项：1.制备重组人源壳多糖酶3样蛋白1的方法，其包括如下步骤：a重组CHI3L1蛋白表达质粒构建：合成CHI3L1基因，接着通过采用XhoI和AgeI双酶切位点亚克隆至pHL-sec质粒中，得到pHL-sec-CHI3L1-6His表达质粒，转入DH5α感受态，通过测序确定后，提取质粒；bHEK-293F细胞的复苏、传代及转染：使冻存的HEK-293F细胞复苏，然后对该细胞进行传代，接着以PEI包裹质粒对细胞进行转染，培养细胞以获得培养液；c重组CHI3L1蛋白的表达和纯化：使用Ni-NTA柱将经转染所得细胞培养液上清进行纯化和浓缩，获得重组人源壳多糖酶3样蛋白1。
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权利要求：
百度查询： 福州国重生物科技有限公司 表达和纯化重组人源壳多糖酶3样蛋白1的方法
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