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炎症性肠病药效筛选流程 

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申请/专利权人:淇嘉科技(苏州)有限公司

摘要:本发明提供了一种炎症性肠病药效筛选流程,通过如下步骤实现药效筛选:1)巨噬细胞包含型结肠类器官的诱导分化、传代扩增、及扩增物质量检定;2)IBD造模及模型质量检定;3)IBD药效评价。该流程基于具备功能性巨噬细胞的结肠类器官建立了一套完整IBD药效筛选流程,可通过抑制炎症反应、恢复粘液含量、修复受损屏障等多个病理指标实现IBD药效的筛选,适用于候选药物的临床前精准评价,以提高新药开发成功率,缩短研发周期。

主权项:1.一种炎症性肠病药效筛选流程,其特征在于:该流程包括如下步骤:1)巨噬细胞包含型结肠类器官的构建诱导多能干细胞分化为具有造血祖细胞的肠管中后侧衍生物,然后择取下层2D细胞进行机械破碎,之后包被于基质胶中依次使用培养基3a和培养基3b继续分化形成结肠类器官;然后将得到的类器官转移至EP管后将其机械破碎,再次使用基质胶包被后,先使用培养基3a预培养,再继续使用培养基3b继续进行培养,每7-10天以1:5-1:10比例进行传代;之后对扩增培养后的类器官进行检定,验证该类器官兼具结肠上皮细胞、间质细胞及肠驻留巨噬细胞;2)IBD造模及检定设置对照组、造模组,分别向对照组、造模组的培养基中加入PBS与DSS处理造模,使用荧光定量Q-PCR方法检测分析IBD病理标志物表达水平验证造模成功;3)IBD药效筛选设置药物组,即向过检造模组的培养基中加入测试药物,连续处理3-7天,并通过检测抑制炎症反应、恢复粘液含量、修复受损屏障中的一项或多项评价IBD药效;当组间P值<0.05,则判定为存在IBD疗效。

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权利要求:

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