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申请/专利权人：中国农业大学
摘要：本发明公开了一种猪源抗菌肽修饰牦牛胃溶菌酶的制备方法及应用，涉及生物工程技术领域，其技术要点为：本发明通过同源重组的方法成功构建了pGAPZα‑MLYZ及pGAPZα‑Z‑MLYZ重组质粒，并在毕赤酵母中成功表达出了重组蛋白，包括牦牛胃溶菌酶和猪源抗菌肽修饰的牦牛胃溶菌酶，为后续猪源抗菌肽修饰的牦牛胃溶菌酶奠定了基础；本发明通过测定发酵上清对细菌的抑菌活性，发现相比于普通的牦牛胃溶菌酶MLYZ，猪源抗菌肽修饰的牦牛胃溶菌酶Z‑MLYZ对革兰氏阴性菌的抑菌活性更强，这表明猪源抗菌肽的修饰提高了牦牛胃溶菌酶的抗菌效果，具有更广泛的应用前景。
主权项：1.一种猪源抗菌肽修饰牦牛胃溶菌酶的制备方法，其特征是：包括以下步骤：S1：合成并优化牛胃溶菌酶基因MLYZ；S2：通过PCR扩增步骤S1所述牛胃溶菌酶基因MLYZ，以获得带有pGAPZα载体同源臂的MLYZ基因片段；S3：将猪源抗菌肽基因连接在步骤S2所述基因片段的N端，获得带有pGAPZα同源臂的Z-MLYZ基因片段；S4：通过反向PCR扩增获得线性化pGAPZα载体；S5：将步骤S3所述Z-MLYZ基因片段与步骤S4所述线性化载体进行同源重组，并转入大肠杆菌感受态细胞，通过筛选、验证以及质粒提取以获得pGAPZα-Z-MLYZ质粒。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国农业大学 一种猪源抗菌肽修饰牦牛胃溶菌酶的制备方法及应用
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