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申请/专利权人：四川大学;生猪技术创新中心(重庆)
摘要：本发明公开了一种基于RAA‑CRISPRCas12a的猪轮状病毒检测系统及试剂盒，属于生物检测技术领域。该检测系统首次将RAA‑Cas12a用于A群轮状病毒的检测，针对猪源轮状病毒的G5型和G9型进行快速灵敏检测。该试剂盒RAA在15min内实现了靶标序列的快速大量扩增，整个反应在37℃恒温条件下孵育，不受大型昂贵仪器的限制，可用于任何情况任何地方。检测时间缩短至30min以内，同时实现了检测的LOD低至100copiesμL。针对猪轮状病毒独特的序列特征，设计两个crRNA同时加入CRISPR反应体系，将核酸信号转变为荧光信号，这种读出方式以便于专业或非专业人士进行检测。
主权项：1.一种基于RAA-CRISPRCas12a的猪轮状病毒检测系统，其特征在于，包括RAA体系和CRISPRCas12a检测体系；所述RAA体系包括基于猪轮状病毒保守序列设计的RAA引物对，所述RAA引物对包括上游引物PoRV-RAA-F2，和下游引物PoRV-RAA-R2；所述上游引物PoRV-RAA-F2的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示；所述CRISPRCas12a检测体系包括基于猪轮状病毒保守序列设计的crRNA1和crRNA2，所述crRNA1的引物PoRV-crRNA1的核苷酸序列如SEQIDNO.9所示，所述crRNA2的引物PoRV-crRNA2的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 四川大学 生猪技术创新中心(重庆) 基于RAA-CRISPR/Cas12a的猪轮状病毒检测系统及试剂盒
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