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一种用于燕麦基因功能研究的VIGS方法及应用 

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申请/专利权人:河北大学

摘要:本发明公开了一种用于燕麦基因功能研究的VIGS方法及应用,涉及基因沉默技术领域。包括以下步骤:1构建载体:将目的基因片段连接在载体pNC‑TRV2上,然后转化大肠杆菌Top10,测序正确的单菌落提取质粒;2农杆菌转化:将构建好的载体转化农杆菌GV3101,涂布于YEPLB+Kan+Rif的固体培养基上,长出菌斑后菌检,将阳性单菌落划线活化备用;3燕麦侵染:转入重组质粒的阳性农杆菌制备VIGS转化菌液,并将VIGS转化菌液通过真空渗透进入正在萌发的燕麦芽尖,进行培养。本发明采用上述的一种用于燕麦基因功能研究的VIGS方法及应用,操作简单、成本低、时间短,可快速的实现燕麦中基因的功能验证。

主权项:1.一种用于燕麦基因功能研究的VIGS方法,其特征在于,包括以下步骤:1构建载体:将目的基因的靶点片段连接在载体pNC-TRV2上,然后转化大肠杆菌Top10,进行测序,测序正确的单菌落提取质粒;2农杆菌转化:将构建好的载体转化农杆菌GV3101,涂布于YEPLB+Kan+Rif的固体培养基上,长出菌斑后菌检,将阳性单菌落划线活化备用;3燕麦侵染:转入重组质粒的阳性农杆菌制备VIGS转化菌液,并将VIGS转化菌液通过真空渗透进入萌发1天后的燕麦芽尖,进行培养,检测目的基因的沉默情况,观察燕麦植株的表型。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 河北大学 一种用于燕麦基因功能研究的VIGS方法及应用

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