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一种鸡TRIM45截短体重组蛋白或其多克隆抗体的应用 

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申请/专利权人:扬州大学

摘要:本发明公开了一种鸡TRIM45截短体重组蛋白或其多克隆抗体的应用。本发明公开了一种鸡TRIM45基因、重组载体、截短体重组蛋白或其多克隆抗体在制备抗禽白血病病毒相关药物中的应用,所述鸡TRIM45基因Genbank登录号为XM_040707211。本发明构建的鸡TRIM45截短体重组蛋白,避免了全长表达稳定性的缺点,同时免疫效果更加稳定且抗体水平较高。同时本发明制备的真核表达载体和多克隆抗体可应用于鸡TRIM45对ALV‑J复制调控的机制研究,具有深远意义,弥补了鸡TRIM45抗体制备及研究的空白;为鸡抗ALV‑J感染和免疫调节的机制研究提供新思路。

主权项:1.一种鸡TRIM45多克隆抗体在制备由ALV-J感染引起的鸡白血病相关药物中的应用,其特征在于,所述鸡TRIM45多克隆抗体的制备方法为:将鸡TRIM45截短体的基因序列插入到pColdI载体,转化后得到鸡TRIM45截短体重组蛋白;对雌性新西兰大白兔进行采血,通过BCA法测定蛋白浓度,调整至1mgml,将纯化复性后的重组蛋白与弗氏完全佐剂按照比例1:1混合后冰上乳化40min,在新西兰大白兔背部进行分5点皮下注射;每隔2周加强免疫一次,加强免疫时使用与蛋白等体积的弗氏不完全佐剂乳化,每只新西兰大白兔注射复性好的重组蛋白250μg,共加强免疫5次;末次免疫后10天,收集新西兰大白兔全血制备TRIM45抗血清,即得含有TRIM45多克隆抗体血清;所述鸡TRIM45截短体的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,导入pColdI载体的基因序列如SEQIDNO.2所示,其中还包含有构建载体的同源臂序列。

全文数据:

权利要求:

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