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鉴定类NADC-30毒株的实时荧光RT-PCR检测引物和探针组 

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申请/专利权人:龙岩学院

摘要:本发明公开了鉴定类NADC‑30毒株的实时荧光RT‑PCR检测引物和探针组,包括两对引物和探针,分别为N1‑F、N1‑R、N1‑P、N2‑F、N2‑R、N2‑P,本发明根据ORF1b和ORF5基因片段分别设计两对特异性引物和探针组,通过优化,建立了NADC30‑likePRRSV的双重实时荧光定量PCR方法。本发明最低可检测到10copiesμL的标准品阳性质粒,使用本发明引物和探针的检测方法具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、准确性高和检测快速等优点,可用于NADC30‑likePRRSV样品的快速检测与定量分析。

主权项:1.鉴定FJZ03毒株的实时荧光RT-PCR检测引物和探针组,其特征在于,其包括两对引物和探针,序列如下:N1-F:ACTTGCTTGTGCTGAGGATCAC;N1-R:GATGACAGGCCACCCCTT;N1-P:FAM-TGCCATGATCTGTTGGTCACGCAG-BHQ1;和,N2-F:AGAGTTGTGCTTGATGGTTCCG;N2-R:ACGACCCCATTGTTCCGC;N2-P:VIC-CCGCAACCCCTGTAACCAAGATTT-BHQ1;反应体系:2×OneStepQProbeMix10μL,OneStepQProbeEnzymeMix1μL,模板2μL,N1-F、N1-R、N2-F、N2-R各0.5μL,N1-P、N2-P各0.2μL,水4.6μL,共20μL体系;反应条件:50℃,15min;95℃,30s;95℃,10s,60℃,30s,40cycles。

全文数据:

权利要求:

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