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申请/专利权人：集美大学
摘要：公开了一种基于恒温自催化CDA‑RCA扩增反应的Hg2+检测方法及应用，包括设计识别单元H0和S、DNA环状模板CDT以及DNA探针；在缓冲液中将待检测样品、DNA反应物、phi29DNA聚合酶和dNTPs混合，孵育后测量荧光强度，当Hg2+存在时，由于T‑Hg2+‑T的特异性结合与识别模块反应，使得I序列裸露激活CDA反应，生成稳定的H1‑H2双链体结构并触发RCA放大器，产生包含大量重复I序列的ssDNA纳米线，重复的I序列又可以跟H1杂交引发下一轮的CDA反应实现信号放大，由于CDA‑RCA可以不断地积累I序列，这种交叉催化放大反应可以持续反馈CDA‑RCA，产生指数放大的荧光共振能量转移信号，该CDA‑RCA放大器成功实现了Hg2+的超灵敏检测，检出限低至11pM，在食品安全检测中具有广阔的应用前景。
主权项：1.一种基于恒温自催化CDA-RCA扩增反应的Hg2+检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、设计DNA反应物，所述DNA反应物包括识别单元H0和S、DNA环状模板CDT以及DNA探针；S2、在缓冲液中将待检测样品、DNA反应物、phi29DNA聚合酶和dNTPs混合，孵育后测量荧光强度；所述识别单元为H0和S，H0包括e、c、d、a*、e*五个部分，其中e*与e互补成双链，c、d、a*为I序列，H0的5'端接有与S杂交的序列，H0的5'端和S链的3'端分别设计3个T碱基；所述DNA探针为H1和H2，H1包括a、d*、c*、b、c、d六个部分，其中d*-c*与d-c互补成双链，H1的5'端接有分裂的P1片段，H2包括c*、b*、c、d、b五个部分，其中b*与b互补成双链，H2的3'端接有分裂的P2片段；所述DNA环状模板CDT包括P片段的互补序列a*、b*和I序列的互补序列c*、d*、a两个部分。
全文数据：
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百度查询： 集美大学 一种基于恒温自催化CDA-RCA扩增反应的Hg2+检测方法及应用
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