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申请/专利权人：浙江大学
摘要：本发明公开了一种定向富集Ca.Brocadia的铁载体、突变株、制备方法及应用，属于废水生物脱氮领域。本发明利用fepA基因敲除的大肠杆菌突变株，该突变株仅产生一种针对Ca.Brocadia的特异性铁载体，特异性铁载体通过重新分配铁资源，可以实现Ca.Brocadia在厌氧氨氧化Anammox生物群落中的定向富集。将上述特异性铁载体应用于Anammox生物反应器进行了废水脱氮处理，30天内Ca.Brocadia占Anammox功能菌的99.9％，与初始相比，Ca.Brocadia绝对丰度提高了2.91倍。添加铁载体的Anammox生物反应器中，总氮去除率和总氮去除效率均高于未添加铁载体反应器，说明该铁载体有利于提升脱氮效能，为废水脱氮的定向调控提供技术储备。
主权项：1.一种能够产生定向富集Ca.Brocadia的铁载体的突变株制备方法，其特征在于，所述突变株的制备步骤如下：S1：分别扩增fepA序列两端基因片段，将扩增后的两端基因片段通过融合PCR方法连接至一起，得到融合片段；将所述融合片段重组至自杀载体pHGM01上，得到重组的第一表达质粒；S2：通过CaCl2法将所述重组的第一表达质粒转化至E.coliWM3064菌株的感受态细胞中诱导表达，得到第二表达质粒；通过接合作用将第二表达质粒转移至E.coliK-12MG1655菌株，并采用含有抗生素的筛选培养基进行筛选培养fepA基因敲除的大肠杆菌突变株；所述筛选培养基中包括LB营养肉汤、庆大霉素和2,6-二氨基庚二酸；能够在筛选培养基上生长的即为能够产生定向富集厌氧氨氧化菌Ca.Brocadia的铁载体的突变株。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江大学 定向富集Ca.Brocadia的铁载体、突变株、制备方法及应用
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