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申请/专利权人:四川大学华西医院
摘要:本发明公开了一种快速标记小鼠多脏器血管和淋巴管并透明化的新方法,涉及生物组织器官标记领域,其技术要点为:包括以下步骤:S1.血管标记;S2.淋巴管标记;S3‑1.预处理;S3‑2.脱脂脱色处理;S3‑3.折射率匹配;S4.对于通过填充式标记的血管或者淋巴管或者两者同时标记后的组织,用共聚焦、光片显微镜或和无标记成像系统进行结果拍摄,成像并分析。通过对现有的透明化方法进行改进,更好的保存填充式标记的染料荧光信号和尽量多的阻止荧光信号的扩散,快速有效标记小鼠血管和淋巴管,标记后的组织经透明化后靶标信号仍保留,且标记保持明亮,可靠性高;通过本方法标记后的血管和淋巴管组织,在透明化后能够完整的展示组织结构、特定血管和淋巴管。
主权项:1.一种快速标记小鼠多脏器血管和淋巴管并透明化的新方法,其特征是:包括以下步骤:S1、血管标记:采用荧光染料A以填充标记的方式对待检测生物组织血管进行注射标记;S2、淋巴管标记:采用荧光染料B作为淋巴管标记物,经末梢外吸收,对淋巴管进行填充式标记;S3包含血管和淋巴管的组织透明化处理:S3-1、预处理:将标记血管和淋巴管后的脏器组织浸泡在固定液中,以4℃的温度固定,完全固定后低温清洗去除固定液;S3-2、脱脂脱色处理:将清洗后的脏器组织浸泡在透明化试剂中,放于摇床上,调整转速;S3-3、折射率匹配:将浸泡透明化试剂后的脏器组织放入折射率匹配试剂中,放于摇床上,调整转速;S4、将填充和\或标记后的血管或淋巴管,用共聚焦、光片显微镜和\或无标记成像系统进行结果拍摄,成像并分析。
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百度查询: 四川大学华西医院 一种快速标记小鼠多脏器血管和淋巴管并透明化的新方法
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