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申请/专利权人:中国农业科学院特产研究所
摘要:本发明涉及中药材应用技术领域,尤其涉及鹿茸干细胞条件培养基的用途。本发明研究表明,鹿茸干细胞条件培养基能够有效促进模拟牙周炎环境造成的牙周骨缺损,并且能够促进骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化,抑制破骨细胞的形成。因此,该鹿茸干细胞条件培养基可以制成药物、保健品或洗漱用品用于伴牙周骨缺损的牙周炎治疗,也可用于其他骨损伤治疗。
主权项:1.鹿茸干细胞条件培养基在制备治疗伴牙周骨缺损的牙周炎的产品中的应用;所述鹿茸干细胞条件培养基的制备方法包括:将梅花鹿的角柄骨膜中分离获得的鹿茸干细胞,在培养瓶中37℃,5%CO2培养箱孵育培养,鹿茸干细胞长至90%以上汇合度时,PBS清洗一遍,加入胰酶消化2分钟,加入完全培养基终止消化,细胞收集至离心管中,1000×g离心,去除上清,重悬细胞,传代至新培养瓶,加完全培养基,培养至70%~80%汇合度时,去除完全培养基,PBS清洗2-3遍,更换不含胎牛血清的条件培养基继续培养,48小时后收集细胞培养上清液,1000×g离心5分钟,去除脱落细胞及碎片,获得鹿茸干细胞条件培养基;使用3KD超滤管于4℃条件下5000×g对获得的鹿茸干细胞条件培养基进行超滤浓缩,使用0.22µm的滤膜进行过滤除菌,置于-80℃超低温冰箱,冷冻过夜;真空冷冻干燥机预冷至-45℃,将冷冻的鹿茸干细胞条件培养基放入真空冷冻干燥机进行干燥,干燥结束后进行低温粉碎,获得含有鹿茸干细胞条件培养基的冻干粉;所述完全培养基由DMEM基础培养基,10%胎牛血清,1%青霉素链霉素组成;所述不含胎牛血清的条件培养基由α-MEM培养基和1%青霉素链霉素组成。
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百度查询: 中国农业科学院特产研究所 鹿茸干细胞条件培养基的用途
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