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申请/专利权人：河南工业大学
摘要：本发明公开了一种检测黄曲霉毒素B1的比色法，利用AFB1核酸适体与金纳米棒的自组装调控金纳米棒的蚀刻，产生丰富的颜色变化。适配体通过静电作用与金纳米棒自组装，促进了TMB2+对金纳米棒的蚀刻，使得金纳米棒的吸收峰发生蓝移，溶液产生从青色到粉色的多色变化。当黄曲霉毒素B1存在时，其特异性结合核酸适配体导致其构象发生变化，金纳米棒与核酸适体无法进行自组装，其蚀刻作用减弱，吸收峰和溶液颜色无明显变化。本发明方法简便易行，对黄曲霉毒素B1的检测限达8pgmL，30min内可完成样品检测，可用于对目标物的高灵敏快速检测。
主权项：1.一种检测黄曲霉毒素B1的比色法，其特征在于：步骤如下：步骤一，配制金纳米棒和十六烷基三甲基溴化铵CTAB的混合液；步骤二，将黄曲霉毒素B1适体加入到步骤一中制备的金纳米棒混合液中，在室温下孵育，形成黄曲霉毒素B1和金纳米棒的自组装体；步骤三，将辣根过氧化物酶HRP与TMB显色液混合孵育，然后加入氯化氢HCl溶液终止反应，制备出蚀刻试剂；步骤四，分别将不同浓度的黄曲霉毒素B1标准品加入到步骤二制备的自组装体中进行孵育，然后加入步骤三制备的蚀刻试剂，得到显色溶液；蚀刻后观察所述显色溶液的颜色变化，并利用微量紫外分光光度计测量金纳米棒的等离子体共振吸收峰λ；其中，在步骤一中，所述的金纳米棒的粒径为50-60nm、表面等离子共振峰SPR在673-675nm、溶液颜色为青色；在步骤一中，所述的十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）使用浓度为0.1M，金纳米棒与十六烷基三甲基溴化铵CTAB的混合比例1：4，混合温度40-60℃；在步骤二中，黄曲霉毒素B1适体为5＇-GTTGGGCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGCCCTTCGCTAGGCCCACA-3＇，适体浓度0.5μM，孵育时间5-10min；在步骤三中，所述的辣根过氧化物酶HRP的浓度为0.01～0.05μgmL，TMB显色液采用单组分TMB显色液，反应时间5min，氯化氢HCl浓度2molL；在步骤四中，所述蚀刻的反应时间为5min。
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权利要求：
百度查询： 河南工业大学 一种检测黄曲霉毒素B1的比色法
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