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申请/专利权人：昆明理工大学
摘要：本发明公开了基于碳点金纳米酶的α‑鹅膏毒肽检测方法，该方法是利用葡萄糖碳点和柠檬酸钠为还原剂及稳定剂制备碳点金纳米酶，该碳点金纳米酶具有较强的拟过氧化物纳米酶特性，能氧化底物TMB为蓝色o‑TMB，α‑鹅膏毒肽特异性结合在纳米酶上覆盖了纳米酶上的活性位点，使纳米酶催化活性下降，利用α‑鹅膏毒肽标准溶液对碳点金纳米酶进行特异性、灵敏度及实际样品的加标回收检测，均表明该碳点金纳米酶检测法具有操作简单、灵敏度高的特点，能实现α‑鹅膏毒肽的可视化检测，检测在20分钟内完成，可在后续应用在对实际样品中的α‑鹅膏毒肽含量进行检测。
主权项：1.一种基于碳点金纳米酶的α-鹅膏毒肽检测方法，其特征在于，步骤如下：（1）以葡萄糖碳点、柠檬酸钠作为还原剂及稳定剂，制备具有拟过氧化酶特性的碳点金纳米酶；（2）在α-鹅膏毒肽标准溶液中加入碳点金纳米酶溶液，然后加入3,3’,5,5’-四甲基联苯胺及H2O2，在652nm波长处测定吸光度，确定α-鹅膏毒肽浓度与吸光度的线性关系，得到回归方程；（3）在待测尿液样品中加入碳点金纳米酶溶液，然后加入3,3’,5,5’-四甲基联苯胺及H2O2，在652nm波长处测定待测样品液的吸光度，吸光度代入步骤（2）回归方程中，获得尿液样品中α-鹅膏毒肽含量；所述碳点金纳米酶的制备如下：（1）称取2-3g柠檬酸、0.5-1g葡萄糖、50-60μL乙二胺溶于40-50mL超纯水中，超声混合均匀，混合液在160-180℃下加热4-5h后，温度升高至200-220℃继续加热4-5h，反应完成后自然冷却至室温，得棕色溶液；棕色溶液用0.22μm滤膜除去大颗粒杂质，制得葡萄糖碳点；（2）将质量浓度1-2%的HAuCl4溶液700-800μL加入到25-30mL的超纯水中，在60-80℃下加热10-15min，再加入0.1-0.5molL的柠檬酸钠溶液100-150μL继续加热10-15min后，加入30-50μL葡萄糖碳点，混合5-10s后加入质量浓度1-2%的HAuCl4溶液300-350μL继续加热10-15min，即得碳点金纳米酶。
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百度查询： 昆明理工大学 基于碳点金纳米酶的α-鹅膏毒肽检测方法
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