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申请/专利权人：华中农业大学
摘要：本发明公开了一种猪急性腹泻综合征冠状病毒的小鼠感染模型构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明基于靶向RNA同源重组技术，利用无缝克隆技术，首先构建含有SADS‑CoV的5′UTR‑ORF1a片段和ORF1b‑Spike‑3′UTR片段的中间质粒，再将SADS‑CoV的Spike基因替换为MHV‑A59的Spike基因，之后病毒拯救出一种嵌合小鼠肝炎病毒Spike基因的重组猪急性腹泻综合征冠状病毒，该重组病毒提高了重组病毒在小鼠体内的感染复制能力和致病力，可用于快速成功地构建重组猪急性腹泻综合征冠状病毒小鼠感染模型，进而用于抗病毒药物的评估以及SADS‑CoV致病机制的研究。
主权项：1.一种重组猪急性腹泻综合征冠状病毒，其特征在于，构建方法包括：基于靶向RNA同源重组技术原理，利用无缝克隆技术将SADS-CoVcDNA上的5′UTR-ORF1a片段和ORF1b-Spike-3′UTR片段克隆至pUC57载体得到中间质粒；再将中间质粒上SADS-CoV的Spike基因片段替换为MHV-A59的Spike基因片段，之后病毒拯救出所述重组猪急性腹泻综合征冠状病毒；所述ORF1b-Spike-3′UTR片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述5′UTR-ORF1a片段的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述SADS-CoV的Spike基因片段核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述MHV-A59的Spike基因片段核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华中农业大学 一种猪急性腹泻综合征冠状病毒的小鼠感染模型构建方法和应用
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