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R环的高通量检测方法 

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申请/专利权人:翌圣生物科技(上海)股份有限公司

摘要:本发明提供了一种R环的高通量检测方法,先使用ddNTP封闭样本中DNA的游离3’‑OH;然后将样本中RNA转化成带biotin修饰的DNA,再进行DNA片段化和末端修复;接头连接;链霉亲和素磁珠富集带biotin修饰的DNA;链特异性文库扩增及测序。本发明提供了一种简便快速的基因组范围检测R环的技术,可以对R环进行高效准确地鉴定,整个流程操作简单、耗时短(不超过4h)、适用性广、灵敏度和准确性高,适用于R环检测商品试剂盒的开发及应用。

主权项:1.一种R环的高通量检测方法,其特征在于其步骤包括:(1)提取样本中的DNA,使用ddNTP封闭样本中DNA的游离3’-OH并回收DNA;(2)使用核糖核酸酶H及DNA聚合酶,将回收DNA中RNA链转化成带生物素标记的dUTP的DNA链,从而获得一条链上含生物素-dUTP的双链DNA;(3)DNA片段化和末端修复;(4)接头连接;(5)链霉亲和素磁珠富集带生物素修饰的DNA;(6)链特异性文库扩增及测序。

全文数据:

权利要求:

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