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申请/专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
摘要：本申请提供的N蛋白的单分子免疫测定方法、测定系统及其应用，捕获抗体捕获的N蛋白与第一抗体、生物素化第二抗体、链霉亲和素和生物素化引物结合，形成夹心免疫复合物；在phi29DNA聚合酶的作用下，生物素化引物以连接的环状挂锁为模板启动RCA反应，以生成长ssDNA链；长的ssDNA链可被CRISPRCas12a识别，并反式裂解为FAM‑ssDNA‑BHQ1探针以产生荧光信号，该方法对N蛋白的线性范围很宽，从3fgmL到3×107fgmL，检测限LOD为1fgmL15amolL，即1μL样品中含有约9个分子，其检测灵敏度比市面上的酶联免疫吸附试剂盒LOD，5.7×104fgmL高出四个数量级。该方法特异性高，能准确鉴定出SARS‑CoV‑2伪病毒，检测灵敏度高。
主权项：1.一种N蛋白的单分子免疫测定方法，其特征在于，包括下述步骤：捕获抗体捕获的N蛋白与第一抗体、生物素化第二抗体、链霉亲和素和生物素化引物结合，形成免疫复合物；在phi29DNA聚合酶的作用下，生物素化引物以连接的环状挂锁为模板启动RCA反应，以生成长ssDNA链；获得的所述长ssDNA序列被CRISPRCas12a识别，并反式裂解为FAM-ssDNA-BHQ1探针以产生荧光信号。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院深圳先进技术研究院 一种N蛋白的单分子免疫测定方法、测定系统及应用
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