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申请/专利权人：四川躬药科技有限责任公司

摘要：本发明提供了一种药用僵蚕的球孢白僵菌孢子粉的发酵工艺，属于微生物培养技术领域。本发明药用僵蚕的球孢白僵菌孢子粉的发酵工艺，它包括液体发酵和固体发酵两个发酵环节，包括如下步骤：a、菌株活化；b、配制灭菌液体培养基；c、一级发酵液的制备；d、二级接种液的制备；e、固体培养基的制备；f、固体产孢的处理；g、干燥、过筛，获得孢子粉。本发明建立了液固双相发酵方法，并利用该方法生产出的白僵菌孢子粉内在质量无显著性差异。将孢子粉应用到僵蚕养殖生产中，所得到药材质量差异较小，并且该方法无需大型发酵罐设备，操作简便，更适用于僵蚕养殖企业大规模生产，降低生产成本。

主权项：1.一种药用僵蚕的球孢白僵菌孢子粉的发酵工艺，其特征在于：它包括液体发酵和固体发酵两个发酵环节，包括如下步骤：a、菌株活化；取纯化斜面菌种，采用划线法接种于SDY固体培养基，倒放置于恒温培养箱半光照培养，待培养基长出淡黄白色分生孢子粉时收集备用；b、配制灭菌液体培养基：液体培养基为去掉琼脂的SDY培养基：葡萄糖40g，酵母浸粉10g，蛋白胨10g，蒸馏水1000mL，0.05%吐温-80，按配方称取原料，混合溶解后分装，灭菌；c、一级发酵液的制备：在无菌条件下，将a步骤孢子粉用0.05%吐温-80无菌水溶液配制成孢悬液，吸取上述孢悬液使得初始接种浓度为2.4×106孢子mL，在温度为26.2℃，摇床转速为174rmin的摇床上培养72小时，得到球孢白僵菌一级发酵液；d、二级接种液的制备：在无菌条件下，转接5%步骤c所述一级发酵液，在温度为26.2℃，摇床转速为174rmin的摇床上培养60小时，得到球孢白僵菌二级接种液；e、固体培养基的制备：取大米装入不锈钢浅盘，添加0.4%葡萄糖和硝酸钾，加水，料水比为2:1W:V，经高压蒸汽灭菌121℃，15min后取出冷却至室温备用；f、固体产孢的处理：在无菌条件下，在固体培养基中加入25%步骤d所述二级接种液，将菌液和大米混合均匀，以保鲜膜进行封口处理，置于温度26℃，湿度RH=85%的条件下培养10d；接种量以大米总数计为25%vw；培养10d，前3d封口黑暗培养，后7d开口光照培养；g、干燥、过筛：培养结束后烘干，过筛，分离米基质，获得孢子粉。

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