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制备核酸用于进一步分析其序列 

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申请/专利权人:贝克顿迪金森公司

摘要:本文的公开内容包括用于全长全转录物组分析WTA的系统、方法、组合物和试剂盒。一些实施方案包括基于5’的基因表达谱分析、基于3’的基因表达谱分析和基于内部的基因表达谱分析。还提供了免疫组库immunerepertoire谱分析方法。

主权项:1.一种用于对样品中的核酸靶进行标记的方法,所述方法包括:使核酸靶的拷贝与第一多于一种寡核苷酸条形码接触,其中所述第一多于一种寡核苷酸条形码中的每一种寡核苷酸条形码包含第一通用序列、第一分子标记和能够与所述核酸靶杂交的第一靶结合区;延伸与所述核酸靶的拷贝杂交的所述第一多于一种寡核苷酸条形码以产生多于一种条形码化核酸分子,所述多于一种条形码化核酸分子各自包含所述第一通用序列、所述第一分子标记和与所述核酸靶的至少一部分互补的序列;使所述条形码化核酸分子与第二多于一种寡核苷酸条形码接触以进行杂交,其中所述第二多于一种寡核苷酸条形码中的每一种寡核苷酸条形码包含第二通用序列、裂解结构域和阻断基团,其中所述阻断基团能够防止所述寡核苷酸条形码的延伸,其中所述裂解结构域位于所述阻断基团的5’,并且其中当所述裂解结构域与条形码化核酸分子杂交时,裂解酶能够在所述裂解结构域内或与所述裂解结构域相邻的点处裂解所述寡核苷酸条形码;使与所述条形码化核酸分子杂交的所述第二多于一种寡核苷酸条形码与所述裂解酶接触,从而从所述寡核苷酸条形码去除所述阻断基团;延伸与所述条形码化核酸分子杂交的所述第二多于一种寡核苷酸条形码中的寡核苷酸条形码的3’末端以产生多于一种延伸的条形码化核酸分子。

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