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申请/专利权人:南昌市第三医院(江西乳腺专科医院、南昌市妇幼保健院)
摘要:本发明涉及医药技术领域,具体公开了一种基于NLRP3炎症小体的类风湿性关节炎辅助检测方法及试剂盒。该技术方案首先探究了RA患者基因表达情况与病理特征之间的关系,NLRP3炎症小体是IL‑1β和IL‑18的上游分子,研究表明IL‑1β和IL‑18在RA的滑膜细胞表达丰富,能激活软骨细胞和破骨细胞导致骨质破坏侵蚀,不同活动期间RA患者外周血单个核细胞中的ATG5、ATG8、Beclin1基因的mRNA相对表达水平呈不同程度的表达差异。基于以上发现,本发明开发了检测RA辅助诊断试剂盒,该试剂盒以人的血清、血浆或其它体液作为生物检材,采用竞争抑制ELISA法定量测定其中ATG5、ATG8、Beclin1含量,可以此为依据来实现RA的辅助检查,并评价RA的病理特征和发展进程。
主权项:1.一种基于NLRP3炎症小体的类风湿性关节炎辅助检测方法,其特征在于,包括:1加样:将孔板上的孔划分为标准孔,待测样品孔,空白孔,其中所述标准孔有3孔,向个标准孔中分别加入3种阳性质控,每种阳性质控各50μL,空白孔加50μL阴性质控,待测样品孔中加入待测样品50μL;每孔加工作液R150μL,振动混匀,孔板加覆膜,于37℃温育1小时;2弃去孔内液体,每孔用250μL的浓缩清洗洗涤液洗涤,浸泡1分钟,而后清除孔内所有液体;重复洗板3次,最后一次洗涤后,倒出剩余的浓缩清洗洗涤液,将酶标板倒扣在吸水纸上,将残留在孔内的液体全部吸干;3每孔加TMB底物100μL,酶标板加上覆膜,于37℃避光显色10~30min;4每孔加终止液50μL,终止反应。
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百度查询: 南昌市第三医院(江西乳腺专科医院、南昌市妇幼保健院) 基于NLRP3炎症小体的类风湿性关节炎辅助检测方法及试剂盒
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