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申请/专利权人：浙江昊清生物科技有限公司
摘要：本发明提供一种从发酵液中分离纯化核苷酸的方法，属于发酵纯化技术领域。包括以下步骤：1调节发酵液pH，添加溶菌酶和核酸酶P1进行反应；2离心取上清，高频振动筛杂蛋白和核糖核酸得上样液；3步骤2上样液使用POROSTMXS树脂和POROSXQ树脂的混合物进行吸附；4甲酸‑甲酸钠溶液洗脱；5NF膜纳滤，升膜浓缩，活性炭脱色，结晶干燥。本发明通过调节吸附材料等条件，在保证一定纯度的条件下提高了核苷酸收率。
主权项：1.一种从发酵液中分离纯化核苷酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）调节发酵液pH，添加溶菌酶和核酸酶P1进行反应；（2）离心取上清，高频振动筛杂蛋白和核糖核酸得上样液；（3）步骤（2）上样液使用POROS™XS树脂和POROSXQ树脂的混合物进行吸附；（4）甲酸-甲酸钠溶液洗脱；（5）NF膜纳滤，升膜浓缩，活性炭脱色，结晶干燥；所述的步骤（1）中发酵液的制备方法为：先将菌种接种于1L种子培养液，震荡培养，培养温度30℃，培养时间24h，得种子液；种子液接种于15-50L发酵培养液进行发酵，接种量5%，发酵温度30℃，发酵时间36h，得发酵液；所述的种子培养液：每1L中含葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠3g，pH为7；所述的发酵培养液：每1L中含葡萄糖5g，硫酸铵5g，磷酸氢二钠10g，硫酸镁10g，硫酸锰100mg，蛋白胨10g，酵母提取物5g，pH为8；所述的菌种为小杆菌205号，保藏号ATCC21376；所述步骤（2）上样液调pH为7-9；所述步骤（3）中POROS™XS树脂和POROSXQ树脂的质量比为1：1-3；所述步骤（4）甲酸-甲酸钠溶液中，甲酸浓度为0.02-0.04M，甲酸钠浓度为0.04-0.06M；所述步骤（4）甲酸-甲酸钠溶液pH4.5-4.8。
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权利要求：
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