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申请/专利权人：晶能科工(北京)制药科技集团有限公司
摘要：本发明公开了一种干细胞储存冷冻保存方法，包括以下步骤：步骤一，制备细胞悬浮液：从适宜的来源中分离并纯化干细胞，步骤二，预处理：在冷冻前，对细胞悬浮液进行预处理，步骤三，冷冻过程：采用程序性降温技术，将预处理后的细胞悬浮液在控制速率下逐渐降温至预定的冷冻温度，步骤四，储存：将冷冻后的细胞悬浮液储存于新型液氮存储设备中，步骤五，解冻复苏：在需要使用干细胞时，将冷冻储存的细胞从低温储存环境中取出，迅速放入预先设定温度的解冻液中，通过采用优化的冷冻保护剂、逐步降温技术以及在冻存和复苏过程中的细致控制，能够显著降低细胞在冷冻和复苏过程中受到的损伤，从而提高细胞的存活率。
主权项：1.一种干细胞储存冷冻保存方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一，制备细胞悬浮液：从适宜的来源中分离并纯化干细胞，将细胞在生长培养基中扩增至所需数量后，使用无血清培养基或含有适宜浓度冷冻保护剂的培养基将细胞制成悬浮液，其中所述冷冻保护剂包括至少一种选自二甲亚砜、甘油和乙二醇的化合物，且其浓度根据细胞类型和冷冻条件进行优化；步骤二，预处理：在冷冻前，对细胞悬浮液进行预处理，包括但不限于减少细胞代谢活性、增加细胞膜的稳定性、优化细胞内外的离子浓度平衡，以及添加抗氧化剂和或抗凋亡剂，以提高细胞在冷冻过程中的存活率；步骤三，冷冻过程：采用程序性降温技术，将预处理后的细胞悬浮液在控制速率下逐渐降温至预定的冷冻温度，其中所述降温过程包括一个或多个不同的降温速率阶段，并且每个阶段的降温速率和持续时间根据细胞类型和冷冻条件进行优化；步骤四，储存：将冷冻后的细胞悬浮液储存于新型液氮存储设备中，或在低于-150℃的低温条件下进行长期储存；步骤五，解冻复苏：在需要使用干细胞时，将冷冻储存的细胞从低温储存环境中取出，迅速放入预先设定温度的解冻液中，通过控制解冻速率和温度，使细胞在解冻过程中受到的损伤最小化。
全文数据：
权利要求：
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