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尿液总RNA提取方法 

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申请/专利权人:江苏康为世纪生物科技股份有限公司

摘要:本发明提供了尿液总RNA提取方法,核心是利用磁珠将尿液样本中的DNA与RNA进行结合,利用负压或离心装置对磁珠混合液进行吸附柱过滤,使结合核酸的磁珠覆在吸附柱膜上,再利用DNA酶对核酸中的DNA进行消化,随后经过磁珠漂洗及洗脱最后获得RNA。本发明通过结合磁珠法与柱式法提取方案能够更高效的获得核酸。利用该提取方法获得的尿液总RNA浓度高,且抑制物含量少,更有利于下游RNA建库测序等疾病检测。

主权项:1.尿液总RNA提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、配制尿液RNA提取试剂;S2、使用尿液RNA保存管采集晨尿,作为样本;S3、依次向离心管中加入125μL蛋白酶K混合液、5mL步骤S2中采集的样本、5mL裂解结合液1并混合均匀,将离心管放入60℃水浴锅内恒温水浴20min,每隔5min涡旋振荡20s;S4、加热完成后,向上一步中的离心管内加入15-25mL裂解结合液2,将离心管置于冰上静置5min;S5、向S4中的离心管内加入60μL核酸结合磁珠,涡旋10min,形成磁珠悬液;S6、利用负压过柱漂洗,获得尿液RNA洗脱液。

全文数据:

权利要求:

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