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申请/专利权人：青海民族大学;中国科学院西北高原生物研究所

摘要：本发明提供一种胡芦巴叶提取物的检测方法，将胡芦巴叶通过超声醇提、溶剂萃取法得到胡芦巴叶提取物。本发明将高效液相色谱与DAD检测器及四极杆飞行时间串联质谱联用，对胡芦巴中的黄酮提取物进行了表征。本发明能够实现8种成分的有效分离，建立了标准可靠的检测方法，为胡芦巴叶提取物的开发和进一步研究提供了参考。

主权项：1.一种胡芦巴叶提取物检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、制备溶液：取胡芦巴叶提取物，加入甲醇有机溶剂，离心，取上清液备用；（2）、将制备的溶液注入高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱仪，按照设定的条件，测得胡芦巴叶提取物的HPLC图谱；所述高效液相色谱的色谱条件为液相条件：流动相A：0.1%甲酸水溶液，流动相B：0.1%甲酸乙腈；流速：0.3mL·min-1；检测波长：254nm；色谱柱：BEH-C18column1.7μm,2.1×150mm,WatersCorp；进样量：3μL；柱温箱：50℃；梯度洗脱程序如下： ；所述检测方法是对如下化合物的检测：槲皮素3-O-β-D-葡萄糖-1→2-β-D半乳糖7-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚3-O-β-D-葡萄糖-1→2-β-D-半乳糖7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-β-D-6''-乙酰基葡萄糖-1→2-β-D-半乳糖7-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚3-O-β-D-6''-乙酰基葡萄糖-1→2-β-D-半乳糖7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素3-O-β-D-葡萄糖-1→2-β-D-葡萄糖苷、山奈酚3-O-β-D-葡萄糖-1→2-β-D-半乳糖苷、槲皮素3-O-β-D-6'''-乙酰基葡萄糖-1→2-β-D-半乳糖苷和山奈酚3-O-β-D-6'''-乙酰基葡萄糖-1→2-β-D-半乳糖苷；所述胡芦巴叶提取物的提取方式：胡芦巴叶阴干和粉碎，经95%乙醇超声提取，提取条件为：料液比1g:10mL，提取5次，每次1h，提取温度60℃，超声频率40kHz;提取后合并上清液，减压浓缩，得到胡芦巴叶醇提物浸膏；将醇提物浸膏加水混悬，依次用2倍体积石油醚和乙酸乙酯各萃取5次，将水萃取组分经减压浓缩和冷冻干燥，得胡芦巴叶提取物；所述质谱的检测条件为：UPLC-Triple-TOF5600+飞行时间液质联用仪：负离子扫描模式；扫描范围：mz100-1500；离子源温度TEM：550℃；离子源电压IS：-4500V；一级扫描：去簇电压DP：100V；聚焦电压CE：10V；二级扫描：使用TOFMS～ProductIon～IDA模式采集质谱数据，CID能量为-20、-40和-60V，进样前，用CDS泵做质量轴校正，使质量轴误差小于2ppm。

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