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申请/专利权人:中国检验检疫科学研究院
摘要:本发明涉及病原菌检测生物技术领域,公开了一种向日葵黑茎病菌特异性检测靶标及快速检测应用,包括特异性检测靶标PLi9004,特异性检测靶标PLi9004的DNA序列如SEQIDNo:1所示。试剂盒包括扩增引物、装有冻干酶混合物的反应单元管、缓冲液、引发剂、检测水和试纸条。本方案为向日葵黑茎病菌提供了新的检测靶标,建立的实时荧光PCR方法,可检测0.176pg向日葵黑茎病基因组DNA;并基于新检测靶标建立了快速、特异、灵敏、便携的恒温检测方法,在39℃下反应20min,即可在常温下利用试纸条快速检测出1.76pg向日葵黑茎病菌基因组DNA。该便携方法可用于带菌植株组织中向日葵黑茎病菌的快速检测,能够对田间疑似黑茎病组织进行快速筛查,有效提升检测方便性,且检测成本较低。
主权项:1.一种基于向日葵黑茎病菌特异性检测靶标PLi9004检测向日葵黑茎病菌的试剂盒,其特征在于:包括扩增引物探针组合、装有冻干酶混合物的反应单元管、缓冲液、引发剂和检测水;所述特异性检测靶标PLi9004的DNA序列如SEQIDNo:1所示;所述特异性检测靶标PLi9004的扩增引物包括常规PCR检测引物对、荧光PCR检测引物对、重组酶聚合酶扩增和试纸条检测引物对中的任意一种;所述常规PCR检测引物对包括如SEQIDNO:2所示的正向引物序列Pl-PCR-F和如SEQIDNO:3所示的反向引物序列Pl-PCR-R;所述荧光PCR检测引物对包括如SEQIDNO:4所示的正向引物序列Pl-qPCR-F和如SEQIDNO:5所示的反向引物序列Pl-qPCR-R;所述重组酶聚合酶扩增和试纸条检测引物对包括如SEQIDNO:7所示的正向引物序列Pl-RPA-F和如SEQIDNO:8所示的反向引物序列Pl-RPA-R。
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百度查询: 中国检验检疫科学研究院 一种向日葵黑茎病菌特异性检测靶标及快速检测应用
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