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申请/专利权人:益善生物技术股份有限公司
摘要:本发明涉及一种细胞角蛋白19基因表达检测试剂盒及检测方法,其包括针对CK19基因mRNA的捕获探针以及信号放大系统;P2序列、间隔臂序列、P1序列、间隔臂序列、P2序列,所述P1序列为能与CK19基因mRNA特异性结合的磷酰二胺吗啉代寡核苷酸序列;所述信号放大系统包括扩增探针和标记探针;每条扩增探针从5’端到3’端的组成依次为:P3序列、间隔臂序列、P4’序列,所述P4’序列为n组P4序列顺次连接,且相邻的两组P4序列之间包含有间隔臂序列;每条标记探针具有与相应扩增探针P4’序列互补配对的P5序列,且末端修饰有荧光基团。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、准确率高等优点,从而能更好地应用于CK19基因表达检测中。
主权项:1.一种细胞角蛋白19基因表达检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括针对检测CK19基因mRNA的捕获探针以及信号放大系统,所述信号放大系统包括扩增探针和标记探针;其中,所述捕获探针用于连接CK19基因mRNA与扩增探针,每条捕获探针从5’端到3’端的组成依次为:P2序列、间隔臂序列、P1序列、间隔臂序列、P2序列;所述P1序列为能与CK19基因mRNA特异性结合的磷酰二胺吗啉代寡核苷酸序列;所述P2序列与P1和CK19基因mRNA之间均不存在特异性结合;所述扩增探针连接捕获探针与标记探针,每条扩增探针从5’端到3’端的组成依次为:P3序列、间隔臂序列、P4’序列;所述P3序列能与捕获探针的P2序列互补配对,所述P4’序列为n组P4序列顺次连接,n为3-20的整数,且相邻的两组P4序列之间包含有间隔臂序列;所述P4序列与P1、P2、P3和CK19基因mRNA之间均不存在特异性结合;所述标记探针连接扩增探针与荧光基团,每条标记探针具有与相应扩增探针P4’序列互补配对的P5序列,且末端修饰有荧光基团;针对CK19基因mRNA的捕获探针中,所述特异性P1序列为SEQIDNO.1~SEQIDNO.10;针对CK19基因mRNA的扩增探针中,P3序列为SEQIDNO.23,P4’序列中的P4序列为SEQIDNO.25;针对CK19基因mRNA的标记探针中,P5序列为SEQIDNO.27;所述间隔臂序列的碱基长度为5个胸腺嘧啶。
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