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申请/专利权人：中南大学
摘要：本申请涉及细胞外泌体的领域，具体提供了一种脂肪干细胞外泌体的制备方法及治疗OSF的应用，该方法包括脂肪干细胞提取和脂肪干细胞外泌体提取，具有操作性强、重复性好的特点，采用低温高速离心结合特定试剂的方法，有效提高了外泌体的纯度和产量。同时，本申请采用了脂肪干细胞外泌体作为治疗OSF的新药物来源，相比传统药物，外泌体具有更低的免疫原性和更高的生物相容性，为OSF的治疗提供了新的思路。
主权项：1.一种脂肪干细胞外泌体的制备方法，其特征在于，包括如下的步骤：S1、脂肪干细胞提取：将脂肪组织置于含有青霉素和链霉素的PBS溶液中；获取脂肪组织中的血管和表皮组织，用含抗生素的PBS溶液浸洗三次；加入2ml胶原酶I，将其置于37℃的水浴中充分消化；消化液呈现为乳糜状时，加入等体积含有10%胎牛血清的MEM-α完全培养基终止消化过程；充分李欣后，将沉淀的细胞转移至含有10%FBS和1%双抗的MEM-α完全培养基中，随后接种到T25细胞培养瓶中进行细胞培养；S2、脂肪干细胞外泌体提取：取第三代脂肪干细胞，融合度达70%以上后去除原培养基，PBS清洗两次，更换为含10%去外泌体胎牛血清、1%双抗和1%谷氨酰胺的MEM-a外泌体浸提培养基，培养2天；收集含外泌体的培养基，充分离心去除细胞碎片后，过滤器过滤，随后转移到装有100KD滤膜的超滤管中，使用低温高速离心机在4℃下充分离心，收集并保留滤膜上层的浓缩液；向收集的浓缩液中加入TotalExosomeIsolationTMreagent混合，充分震荡后在4℃下过夜孵育；将混合液转移到的EP管中，4℃下充分离心并弃去上清液，得到的沉淀即为脂肪干细胞外泌体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中南大学 脂肪干细胞外泌体的制备方法及治疗OSF的应用
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