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申请/专利权人：河南科技大学第一附属医院

摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种食管癌小鼠模型的构建方法及应用。本发明通过基因编辑技术，敲除C57BL6J小鼠的Trp53基因的第2‑9号外显子全部编码区DNA片段以及在C57BL6J小鼠的Rosa26安全位点插入Ccnd1基因的全部编码区DNA片段，得到Trp53基因敲除且Ccnd1基因过表达纯合子小鼠，该小鼠能够完整模拟人食管癌发生发展的各个阶段，且该小鼠免疫健全，用于填补小鼠自发形成食管癌模型的空白，解决目前因缺少小鼠食管癌模型而产生的相关难题，为食管癌的肿瘤免疫研究提供合适的研究工具。

主权项：1.一种食管癌小鼠模型的构建方法，其特征在于包含如下步骤：1将Ccnd1cKIcKI纯合子小鼠与EDL2-CreKIKI纯合子小鼠杂交配繁，得到Ccnd1cKI+；EDL2-CreKI+杂合子小鼠；将Trp53flfl纯合子小鼠与Ccnd1cKIcKI纯合子小鼠杂交配繁，得到Trp53fl+；Ccnd1cKI+杂合子小鼠；2分别将步骤1获得的Ccnd1cKI+；EDL2-CreKI+杂合子小鼠自交、Trp53fl+；Ccnd1cKI+杂合子小鼠自交，分别得到Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKIKI纯合子小鼠和Trp53flfl；Ccnd1cKIcKI纯合子小鼠；3将步骤2获得的Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKIKI纯合子小鼠和Trp53flfl；Ccnd1cKIcKI纯合子小鼠杂交配繁，得到Trp53fl+；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKI+杂合子小鼠；4将步骤3获得的Trp53fl+；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKI+杂合子小鼠分别与步骤2获得的Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKIKI纯合子小鼠和Trp53flfl；Ccnd1cKIcKI纯合子小鼠杂交配繁，分别得到代Trp53fl+；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKIKI杂合子小鼠和Trp53flfl；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKI+杂合子小鼠；5将步骤4获得的Trp53fl+；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKIKI杂合子小鼠和Trp53flfl；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKI+杂合子小鼠杂交配繁，得到Trp53flfl；Ccnd1cKIcKI；EDL2-CreKIKI纯合子小鼠，即为食管癌模型小鼠。

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百度查询： 河南科技大学第一附属医院 一种食管癌小鼠模型的构建方法及应用