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一种mNGS病原体自动化匹配检测的共建库方法 

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申请/专利权人:星云基因科技有限公司

摘要:本发明公开一种mNGS病原体自动化匹配检测的共建库方法,包括步骤:S1、核酸纯化:DNA、RNA共提试剂盒;S2、RNA核酸经gDNA消化、双链合成cDNA,cDNA合成过程中的时间优化;S3、DNA和cDNA按照不同比例混合后,进行片段化和末端修复、接头连接、接头连接产物纯化、纯化产物的扩增和PCR产物纯化;S4、得到RNA和DNA的文库;S5、通过Agilent2100Bioanalyzer进行文库片段分析。本发明解决了现有mNGS检测流程分叉,RNA检测建库时间久,缺乏在一台建库仪上同时能进行DNA、RNA和DNA+RNA的文库构建方法的问题。

主权项:1.一种mNGS病原体自动化匹配检测的共建库方法,其特征在于,包括步骤:S1、核酸纯化:DNA、RNA共提试剂盒;S2、RNA核酸经gDNA消化、双链合成cDNA,合成时间的优化;S3、共建库时cDNA与DNA按不同的比例混合,混合方式包括以加样体积为衡量标准和以核酸质量为衡量标准,混合后进行片段化和末端修复、接头连接、接头连接产物纯化、纯化产物的扩增和PCR产物纯化;S4、得到RNA和DNA的文库;S5、通过Agilent2100Bioanalyzer进行文库片段分析。

全文数据:

权利要求:

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