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申请/专利权人:南阳师范学院
摘要:本发明提供了一种稻黑孢霉菌遗传转化体系的构建方法,属于稻黑孢霉菌转化技术领域。本发明所述稻黑孢霉菌遗传转化体系的构建方法,包括:将稻黑孢霉菌原生质体与STC试剂混合,将混合后悬浮液与含有抗生素标记基因和目的基因的质粒混合,得到第一原生质体溶液;之后依次加入100、200、500μL的PEG4000溶液,依次得到第二、第三和第四原生质体溶液;将第四原生质体溶液加入复苏培养基中,得到含复苏的原生质体的培养皿;之后将其与选择性培养皿混合,进行黑暗培养,得到稻黑孢霉菌转化子。本发明采用上述方法得到了稻黑孢霉菌遗传转化体系,为后续研究稻黑孢霉菌的侵染机制提供帮助。
主权项:1.一种稻黑孢霉菌遗传转化体系的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:1将稻黑孢霉菌原生质体与STC试剂混合,得到稻黑孢霉菌原生质体悬浮液;2将所述稻黑孢霉菌原生质体悬浮液与含有抗生素标记基因和目的基因的质粒混合,进行冰浴,得到第一原生质体溶液;3向所述第一原生质体溶液中加入100μLPEG4000溶液,得到第二原生质体溶液;4向所述第二原生质体溶液中加入200μLPEG4000溶液,得到第三原生质体溶液;5向所述第三原生质体溶液中加入500μLPEG4000溶液,得到第四原生质体溶液;6将所述第四原生质体溶液加入复苏培养基中进行复苏,得到含复苏的原生质体的培养皿;7将所述含复苏的原生质体的培养皿与选择性培养皿混合,进行黑暗培养,得到稻黑孢霉菌转化子。
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权利要求:
百度查询: 南阳师范学院 一种稻黑孢霉菌遗传转化体系的构建方法
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