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申请/专利权人：石河子大学
摘要：本发明提供了一种农杆菌介导红花外植体的转化方法，该方法为：先进行农杆菌活化，制备OD600＝0.6‑0.8的菌液，将菌液加入到诱导培养基中进行培养，得到侵染液；然后将无菌处理后的红花种子播于种子培养基中进行培养，得到再生苗，以再生苗的生长点、下胚轴或子叶作为外植体，用侵染液进行外植体侵染，再进行农杆菌和外植体共培养，诱导培养和分化培养，直至分化出胚性愈伤组织或者再生苗。本发明改进了现有的红花遗传转化体系，显著提高了愈伤分化率和胚性愈伤形成率。
主权项：1.一种农杆菌介导红花外植体的转化方法，其特征在于，所述转化方法包括以下步骤：S1、农杆菌活化：挑取单个农杆菌菌落，然后加入LB培养基，在一定温度下振荡培养，得到培养物；将所述培养物接种于新的所述LB培养基中，在一定温度下振荡培养，得到菌液；S2、侵染液制备：将S1中得到的菌液加入到诱导培养基中，在一定温度下振荡培养，得到侵染液；S3、外植体制备：将红花种子经无菌处理后，播于种子培养基中，在一定温度的暗室中培养，培养1d后扶苗，培养6-7d得到再生苗；将所述再生苗置于无菌环境下，在子叶下方生长点处横切，得到外植体；或者用所述再生苗的下胚轴或子叶作为外植体；S4、农杆菌侵染外植体：将S3中得到的外植体置于S2中得到的侵染液中浸泡，同时保持摇动，取出得到共培养侵染后的外植体；S5、农杆菌和外植体共培养：将S4中得到的共培养侵染后的外植体用无菌滤纸吸去残留液体，然后放入铺有一层无菌滤纸的共培养培养基上在一定温度下进行暗培养，得到共培养的外植体；S6、诱导培养和分化培养：将S5中得到的共培养的外植体转移至愈伤诱导培养基中，在一定温度下进行培养，两周到三周继代一次，共继代两次；然后转接到分化培养基进行分化继代培养，25d继代一次，直至分化出胚性愈伤组织或者再生苗。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 石河子大学 一种农杆菌介导红花外植体的转化方法
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