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一种酪氨酸磷酸酶底物鉴定方法 

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申请/专利权人:上海科技大学

摘要:本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种酪氨酸磷酸酶底物鉴定方法。本发明所提供的酪氨酸磷酸酶底物鉴定方法,包括:将包括潜在的与酪氨酸磷酸酶相互作用的底物的体系置于酪氨酸磷酸酶‑PafA融合蛋白、pup蛋白存在的条件下,并标记pup蛋白;通过被标记的pup蛋白,富集潜在的与酪氨酸磷酸酶相互作用的底物;所述酪氨酸磷酸酶‑PafA融合蛋白包括酪氨酸磷酸酶片段和PafA片段,所述酪氨酸磷酸酶片段具有底物捕获突变体。本发明所提供的酪氨酸磷酸酶底物鉴定方法和体系可以将针对酪氨酸磷酸酶的生物学研究推广到任意一个重要的酪氨酸磷酸酶家族成员,具有良好的产业化前景。

主权项:1.一种酪氨酸磷酸酶底物鉴定方法,包括:1)将包括潜在的与酪氨酸磷酸酶相互作用的底物的体系置于酪氨酸磷酸酶-PafA融合蛋白、pup蛋白存在的条件下,并标记pup蛋白;2)通过被标记的pup蛋白,富集潜在的与酪氨酸磷酸酶相互作用的底物;所述酪氨酸磷酸酶-PafA融合蛋白包括酪氨酸磷酸酶片段和PafA片段,所述酪氨酸磷酸酶片段具有底物捕获突变,所述酪氨酸磷酸酶片段为SHP1片段,其氨基酸序列为在SEQIDNO.1所示的基础上进行D419A突变;所述与酪氨酸磷酸酶作用的底物为THEMIS,其氨基酸序列如SEQIDNO.14所示。

全文数据:

权利要求:

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