买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：大连深蓝肽科技研发有限公司

摘要：纳豆低聚肽及其制备方法和在溶栓降压中的应用，属于活性肽制备领域，为了解决获取具有抗血栓作用的纳豆来源的多聚肽的问题，生物活性肽数据库中检索并确定与纳豆抗血栓功能相关肽的特性，特性的信息包括分子量低于2000Da，N端氨基酸残基种类为甘氨酸G，C端氨基酸残基种类为赖氨酸K或精氨酸R，净电荷为±2；统计肽的溶液中的各肽位于甘氨酸G前位的氨基酸残基种类以及位于精氨酸R前位的氨基酸残基种类及数量；根据统计数量排序，将其中的肽键作为酶切位点，使用复合蛋白酶对酶切位点切分；收集低分子量的肽的溶液以及净电荷±2的肽的溶液，效果是保留纳豆中纳豆激酶溶栓活性的同时，释放游离L‑精氨酸，提高终产物纳豆低聚肽的抗血栓降压效果。

主权项：1.一种纳豆抗血栓功能低聚肽的制备方法，其特征在于，包括生物活性肽数据库中检索并确定与纳豆抗血栓功能相关肽的特性，所确定的特性的信息包括分子量低于2000Da，N端氨基酸残基种类为甘氨酸G，C端氨基酸残基种类为赖氨酸K或精氨酸R，净电荷为±2；制备纳豆的肽的溶液，包括纳豆激酶组分的溶液和纳豆的小肽溶液；对纳豆的小肽溶液中的肽进行测序，根据所述测序，分别统计所述纳豆的小肽溶液中的各肽位于甘氨酸G前位的氨基酸残基种类和数量以及位于精氨酸R前位的氨基酸残基种类和数量；根据统计数量排序，依据排序将其中的酪氨酸-甘氨酸肽键、苯丙氨酸-甘氨酸肽键、酪氨酸-精氨酸肽键、赖氨酸羧基端肽键以及精氨酸羧基端肽键作为酶切位点，使用复合蛋白酶对酶切位点切分，所述复合蛋白酶由胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶组成，其中，胰蛋白酶：胰凝乳蛋白酶=1:（1-3），酶解温度：37-45℃，酶解pH：7.5-8.5，酶解时间：3-6h；将切分后的肽的溶液过滤，收集分子量低于2000Da的肽的溶液；将分子量低于2000Da的肽的溶液分离纯化，收集净电荷±2的肽的溶液，得第一低聚肽；将所述净电荷±2的肽的溶液与纳豆激酶组分的溶液混合得第二低聚肽；其中，制备所述纳豆激酶组分的溶液，包括：将纳豆粉溶液通过分子量29000Da的超滤膜，得第一透过液；将所述第一透过液通过分子量26000Da的超滤膜，得第二透过液和第二截流液；其中，所述第二截流液是所述纳豆激酶组分的溶液；其中，制备所述纳豆的小肽溶液，包括向所述第一透过液，所述第二截流液中加入消化酶，得所述纳豆的小肽溶液；其中，所述消化酶为胰蛋白酶；其中，根据统计数量排序的步骤，包括对不同种类的甘氨酸G前位的氨基酸残基，按照数量排序；对不同种类的精氨酸R前位的氨基酸残基，按照数量排序；依据不同种类的甘氨酸G前位的氨基酸残基数量的排序，将其中数量最多或前几多的氨基酸残基种类，与甘氨酸G的肽键切分得N端氨基酸残基种类为甘氨酸G的肽；依据不同种类的精氨酸R前位的氨基酸数量的排序，将其中数量最多或前几个最多的氨基酸残基种类，与精氨酸R的肽键切分得N端氨基酸残基种类为精氨酸R的肽；对赖氨酸羧基端肽键切分得C端氨基酸残基种类为赖氨酸K的肽；对非N端氨基酸残基种类为精氨酸R的肽的精氨酸羧基端肽键切分得C端氨基酸残基种类为精氨酸R，对N端氨基酸残基种类为精氨酸R的肽的精氨酸R切分得游离的L-精氨酸。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 大连深蓝肽科技研发有限公司 纳豆低聚肽及其制备方法和在溶栓降压中的应用