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申请/专利权人：常州大学
摘要：本发明公开了一种通过解耦联增加大肠杆菌中重组蛋白表达的方法，包括，将表达T7RNA聚合酶的1基因以及表达T7噬菌体调控蛋白2、5.7的基因分别构建表达载体整合在大肠杆菌基因组上，利用磷衰减启动子控制调控蛋白基因的表达；T7RNA聚合酶控制启动子来启动的目的蛋白的转录；本发明以荧光蛋白RFP为例，经摇瓶发酵，荧光蛋白RFP在整合2基因+5.7基因的菌株BWY04中的表达量是BWY01的3.2倍。经发酵罐放大培养后，RFP在BWY04的产量可达到5.4gL，RFPBWY01的产量为1.4gL，经计算RFP在BWY04中的产量是BWY01的3.85倍。
主权项：1.一种宿主细胞，其特征在于：所述宿主细胞为大肠杆菌，包括如下A1～A3中的一种或多种：A1包含在启动子控制下的编码来自噬菌体的两个抑制所述细菌宿主细胞生长的蛋白的核苷酸序列，其中生长通过抑制转录而被抑制；A2包含编码对于所述细菌宿主细胞是异源的RNA聚合酶的核苷酸序列，其中所述RNA聚合酶是T7噬菌体RNA聚合酶；A3包含在由所述RNA聚合酶识别的启动子控制下的编码目的蛋白的核苷酸序列，其中编码来自噬菌体的两个抑制所述细菌宿主细胞生长的蛋白的所述核苷酸序列和编码所述RNA聚合酶的所述核苷酸序列被整合到所述宿主细胞的基因组中，并且其中所述来自噬菌体的抑制所述细菌宿主细胞生长的蛋白是抑制细菌宿主细胞RNA聚合酶的蛋白，两个抑制所述细菌宿主细胞生长的蛋白为Gp2和Gp5.7，Gp2的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示，Gp5.7的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 常州大学 一种通过解耦联增加大肠杆菌中重组蛋白表达的方法
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