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申请/专利权人：合肥欧创基因生物科技有限公司
申请日：2020-11-18
公开（公告）日：2021-02-19
公开（公告）号：CN112375808A
主分类号：C12Q1/6811(20180101)
分类号：C12Q1/6811(20180101);C12Q1/6886(20180101);C12Q1/6858(20180101)
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2021.03.09#实质审查的生效;2021.02.19#公开
摘要：本发明公开了一种ARMS‑TaqManBlocker体系的Blocker设计和筛选方法，设计方法将Blocker设计在突变位点处，覆盖突变位点即可；Blocker与野生型模板完全匹配，完全匹配的Tm值高于ARMS引物与野生型模板匹配的Tm值，允许熔点差低于5℃；Blocker与突变型模板不完全匹配，不完全匹配的Tm值与ARMS引物跟突变型模板的Tm值一致或接近；Blocker的3’末端添加多个与模板不匹配的无关碱基；筛选方法为，按照上述Blocker设计原则设计3‑10条Blocker，使这些Blocker与突变型模板匹配的Tm值在ARMS引物跟突变型模板匹配的Tm值附近呈现逐步升高的梯度，然后经实时PCR验证梯度Blocker对体系灵敏度和特异性的影响，筛选出对灵敏度无影响且特异性最好的Blocker。本发明提供的Blocker设计和筛选方法降低成本的同时，提升了体系的特异性。
主权项：1.一种ARMS-TaqManBlocker体系的Blocker设计方法，其特征在于，将Blocker设计在突变位点处，覆盖突变位点即可；Blocker与野生型模板完全匹配，完全匹配的Tm值高于ARMS引物与野生型模板匹配的Tm值，允许熔点差低于5℃；Blocker与突变型模板不完全匹配，不完全匹配的Tm值与ARMS引物跟突变型模板的Tm值一致或接近；Blocker的3’末端添加多个与模板不匹配的无关碱基。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 合肥欧创基因生物科技有限公司 一种ARMS-TaqMan Blocker体系的Blocker设计和筛选方法
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