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申请/专利权人:华南理工大学
摘要:本发明公开了一种毕赤酵母翻译相关因子Bcy1在外源蛋白表达中的应用。本发明中发现毕赤酵母翻译相关因子Bcy1注释为蛋白激酶A调节亚基,可以显著提高细胞发酵过程中的生物量,提高增强型绿色荧光蛋白eGFP的表达量,提高植酸酶Phy的表达量,以及可促进毕赤酵母发酵稳定期的细胞生长,增加细胞生物量积累,说明毕赤酵母翻译相关因子Bcy1具有很强的通用性,其在增加发酵过程中生物量积累和提高外源蛋白的产量方面具有良好的应用前景。
主权项:1.一种毕赤酵母翻译相关因子Bcy1在外源蛋白表达中的应用,其特征在于:是将毕赤酵母翻译相关因子Bcy1表达于毕赤酵母外源蛋白表达工程菌株,具体通过如下步骤实现:(1)以载体pPICZA为模板,以SEQIDNo.9和SEQIDNo.10为引物进行PCR扩增,得到pPICZA线性片段;然后将pPICZA线性片段与毕赤酵母翻译相关因子Bcy1进行同源重组,得到重组载体pPICZA-Bcy1;(2)将重组载体pPICZA-Bcy1转化至大肠杆菌感受态中,用含Zeocin的培养基进行筛选,再提取质粒转化至毕赤酵母外源蛋白表达工程菌株中,得到重组表达工程菌;所述的毕赤酵母翻译相关因子Bcy1为蛋白激酶A调节亚基,其氨基酸序列如SEQIDNo.1所示;所述的外源蛋白为增强型绿色荧光蛋白和植酸酶中的一种。
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