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靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用 

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申请/专利权人:西安交通大学医学院第一附属医院

摘要:本发明公开了靶向敲除ARID1A基因的sgRNA、构建ARID1A基因缺失细胞株的方法及应用,属于生物医药技术领域。通过构建重组慢病毒质粒ARID1AsgRNA‑lentiCRISPRv2、将CRISPRCas9慢病毒系统通过293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒、将慢病毒颗粒感染目的细胞株、有限稀释法传代筛选,可获得稳定的ARID1A基因敲除的细胞株。Westernblot蛋白表达检测显示,基因敲除的细胞株ARID1A蛋白表达完全缺失。另外,ARID1A基因敲除的细胞株增殖能力明显增强。结果表明,利用CRISPRCas9慢病毒系统成功敲除ARID1A基因后,可促使胃上皮细胞的恶性转化。

主权项:1.用于靶向敲除人ARID1A基因的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA为Exon2-sgRNA或Exon3-sgRNA,Exon2-sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,Exon3-sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。

全文数据:

权利要求:

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