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申请/专利权人：兰州市农业科技研究推广中心

摘要：本发明提供了一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，主要包括如下步骤：（1）花蕾采集：选择优良性状的玫瑰品种的植株作为父本，选择苦水玫瑰的植株作为母本，摘取整朵父本花蕾；（2）花药干燥保存：将摘取的父本花蕾打开，取下新鲜的花药；（3）花粉收集：待花药上的花粉自然散落后，将花粉进行收集；（4）授粉：待母本花蕾即将绽放时，蘸取少量父本花粉并涂抹于母本花蕾柱头上；（5）套袋：将授粉袋套入授粉完成的母本花朵上并封口；（6）去袋：等待一段时期后，取下授粉袋即可。本发明针对苦水玫瑰自交不亲和的研究发现，提出了一种苦水玫瑰作为母本的免去雄人工杂交授粉方法，该方法操作简单，省时省力，育种成功率高。

主权项：1.一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）花蕾采集：根据育种目标选择优良性状的玫瑰品种的植株作为父本，选择苦水玫瑰的植株作为母本，在父本花蕾充分膨大时摘取整朵花蕾；（2）花药干燥保存：将摘取的父本花蕾打开，取下新鲜的花药并于室温下放置12-24h；（3）花粉收集：待花药上的花粉自然散落后，将花粉进行收集；（4）授粉：待母本花蕾即将绽放时，轻轻将花瓣打开，蘸取少量父本花粉并涂抹于母本花蕾柱头上；完成时间选择在上午9:00～11:00；（5）套袋：将授粉袋套入授粉完成的母本花朵上并封口；（6）去袋：等待一段时期后，取下授粉袋即可。

全文数据：一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法技术领域本发明属于植物杂交育种技术领域，涉及一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法。背景技术玫瑰是蔷薇科Rosarugosa蔷薇属Rosaceae的落叶灌木，在我国甘肃苦水、山东平阴、辽宁、云南及新疆等地有较大面积的栽培，玫瑰花及其精油等副产品在观赏、药用、食用、日化等方面都有宝贵的价值。我国当前玫瑰的主栽品种是“重瓣玫瑰”和“苦水玫瑰”。“苦水玫瑰”（R.sertataXR.rugosaYu.Et.Ku.）是玫瑰与钝齿蔷薇的自然杂交种，最初在甘肃省永登县苦水镇繁殖推广，并冠以地名。目前已有200多年的栽培历史，在当地的栽培面积已达到18万亩，苦水玫瑰产业成为当地特色产业。长期以来，苦水玫瑰的繁育以无性繁殖技术为主，包括分株和压条繁殖，以及近年来技术上有所突破的扦插繁殖技术。但长期的无性繁殖使得苦水玫瑰抗性逐年降低，影响了其产量及品质的进一步提升，而且由于品种单一，制约了当地玫瑰产业的发展。充分利用现有的玫瑰种质资源，培（选）育出花期长、产量高、出油率高、抗病性强、品质优良的玫瑰品种，对于玫瑰产业的健康发展具有极为重要的意义。目前，玫瑰常用的育种方法有：（1）引种驯化；（2）选择育种，包括芽变选择和实生选种；（3）杂交育种；（4）其他育种方法（包括自交育种、辐射育种等）。与玫瑰同属的月季作为世界上第一大观赏植物，大多数品种都是通过长期杂交培育得到的，因此，杂交育种是玫瑰育种的一种重要途径和方法，而在杂交育种过程中，授粉环节至关重要。目前，尚未有苦水玫瑰人工杂交育种授粉技术的报道。发明内容本发明的目的在于针对现有技术存在的问题，提供一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，以实现苦水玫瑰的杂交育种和品种改良。为此，本发明采用如下技术方案：一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，包括如下步骤：（1）花蕾采集：根据育种目标选择优良性状的玫瑰品种的植株作为父本，选择苦水玫瑰的植株作为母本，在父本花蕾充分膨大时摘取整朵花蕾；（2）花药干燥保存：将摘取的父本花蕾打开，取下新鲜的花药并于室温下放置12-24h；（3）花粉收集：待花药上的花粉自然散落后，将花粉进行收集；（4）授粉：待母本花蕾即将绽放时，轻轻将花瓣打开，蘸取少量父本花粉并涂抹于母本花蕾柱头上；（5）套袋：将授粉袋套入授粉完成的母本花朵上并封口；（6）去袋：等待一段时期后，取下授粉袋，统计座果率和结实率。进一步地，步骤（4）的完成时间选择在上午9:00～11:00。进一步地，步骤（5）中，套袋完成后在授粉袋上标明授粉时间和父本信息，若整株苦水玫瑰用同一父本进行授粉时，在植株底部挂牌标明相关信息。进一步地，步骤（5）中，所述授粉袋选用硫酸纸袋。进一步地，步骤（6）中，在母本植株座果后并且待果实成熟后，再取下授粉袋。选择在果实成熟后取下授粉袋，是因为玫瑰在7月之后进行营养生长，枝叶繁密，若无授粉袋则果实成熟后容易被繁密的枝叶遮挡，授粉袋与玫瑰枝叶颜色差异较为明显，故保留至果实成熟后，便于识别并采摘。经申请人研究发现，苦水玫瑰的雄性是不育的，可在授粉时免除去雄的步骤，直接用选择的父本花粉进行授粉即可，这是以往的研究所未注意到的。因此，本发明步骤（4）授粉时省略了去雄的操作，直接进行授粉。以下为申请人所做的苦水玫瑰雄性不育的验证（亲和性测定）试验：1.实验设计亲和性测定设5个处理，A：不去雄、不授粉套袋（自然授粉）；B：不去雄自花授粉套袋（自花授粉）；C：去雄后套袋（孤雌生殖）；D：异株授粉套袋（异花授粉）；E：异种授粉（苦水玫瑰为父本，紫枝玫瑰为母本）；对照CK：去雄后异种授粉套袋（苦水玫瑰为母本，紫枝玫瑰为父本）。每个处理30朵单花，一个月后统计子房膨大率。子房膨大率（%）=子房膨大个数总授粉花朵数×100%结果发现，当父母本均为苦水玫瑰时，不论是否去雄，在人工授粉和自然授粉时未见子房膨大，子房膨大率为0；当苦水玫瑰为父本，紫枝玫瑰为母本时，子房膨大率为0；对照即苦水玫瑰为母本，紫枝玫瑰为父本时，子房膨大率为86.67%（见表1）。试验结果表明：苦水玫瑰雄性不育，且不能行孤雌生殖，属完全自交不亲和植物。表1苦水玫瑰亲和力测定为进一步验证本发明方案的可行性，针对不同的父本品种，采用本发明提供的方法进行杂交实验，具体结果如表2所示。表2不同玫瑰杂交组合的座果率和结实率统计实验中，作为父本的玫瑰品种有‘紫枝白玫瑰’、‘保加利亚红玫瑰’、‘商水玫瑰’、‘重瓣紫枝粉玫瑰’、‘刺果玫瑰’、‘重瓣紫枝红玫瑰’和‘辽宁四季玫瑰’等7种，结果显示，“商水玫瑰”作为父本的座果率最高，达93.33%，7种组合的平均座果率可达79.11%。从每个果实所含种子数目来看，结实率较高的组合有‘紫枝白玫瑰’、‘保加利亚红玫瑰’、‘商水玫瑰’和‘重瓣紫枝粉玫瑰’，其每枚果实所含种子均超过10粒，7种组合的平均结实率为9.4。说明利用本发明方法获得了较好的座果率和结实率。为进一步验证授粉时间对苦水玫瑰杂交的影响，本发明还进行了不同授粉时间对苦水玫瑰结实率的影响实验，具体结果见表3。表3不同授粉时间对苦水玫瑰结实率的影响由表3可见，分别在上午时间段和下午时间段进行授粉，上午9:00～11:00授粉较下午14:00～16:00授粉能够明显提高苦水玫瑰的结果数和结实率，因此，优选在上午9:00～11:00进行授粉。本发明的有益效果在于：针对苦水玫瑰自交不亲和的研究发现，提供了一种苦水玫瑰作为母本的免去雄人工杂交授粉方法，该方法操作简单，省时省力，育种成功率高。具体实施方式下面通过具体实施例对本发明方法做进一步说明。一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，包括如下步骤：（1）花蕾采集：根据育种目标，选择优良性状的玫瑰品种的植株作为父本，选择苦水玫瑰作为母本，在父本花蕾充分膨大时摘取整朵花蕾；（2）花药干燥保存：将父本花蕾打开，取下新鲜的花药并盛于平整洁净的硫酸纸上，于室温下放置12-24h；（3）花粉收集：待硫酸纸上的花粉自然散落后，装入离心管内封存；（4）授粉：待母本花蕾即将绽放时，轻轻将花瓣打开，用棉签蘸取少量父本花粉涂抹于母本花蕾的柱头上，并选择在上午9:00～11:00完成授粉；（5）套袋：用硫酸纸袋（5cm*5cm）套入授粉完成的花朵上，用订书机进行封口，同时用记号笔在硫酸纸袋上标明授粉时间和父本信息，若整株苦水玫瑰用同一父本进行授粉时，则在植株底部挂牌标明相关信息；（6）去袋：在母本植株座果后并待果实成熟，摘取硫酸纸袋即可。

权利要求：1.一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）花蕾采集：根据育种目标选择优良性状的玫瑰品种的植株作为父本，选择苦水玫瑰的植株作为母本，在父本花蕾充分膨大时摘取整朵花蕾；（2）花药干燥保存：将摘取的父本花蕾打开，取下新鲜的花药并于室温下放置12-24h；（3）花粉收集：待花药上的花粉自然散落后，将花粉进行收集；（4）授粉：待母本花蕾即将绽放时，轻轻将花瓣打开，蘸取少量父本花粉并涂抹于母本花蕾柱头上；（5）套袋：将授粉袋套入授粉完成的母本花朵上并封口；（6）去袋：等待一段时期后，取下授粉袋即可。2.根据权利要求1所述的一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，其特征在于，步骤（4）的完成时间选择在上午9:00～11:00。3.根据权利要求1所述的一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，其特征在于，步骤（5）中，套袋完成后在授粉袋上标明授粉时间和父本信息，若整株苦水玫瑰用同一父本进行授粉时，在植株底部挂牌标明相关信息。4.根据权利要求1所述的一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述授粉袋选用硫酸纸袋。5.根据权利要求1所述的一种中国苦水玫瑰人工授粉的方法，其特征在于，步骤（6）中，在母本植株座果后并且待果实成熟后，再取下授粉袋。

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