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申请/专利权人：中国人民解放军海军军医大学
摘要：本发明涉及生物色谱领域，具体是一种原位合成膜蛋白亲和生物色谱柱及其制备方法和应用，所述方法采用cell‑free蛋白表达和共价固定化亲和色谱技术，构建新的原位合成膜蛋白生物色谱柱。本发明制备的色谱柱首次实现将单一的具有天然四级结构的膜蛋白单向插入键合脂质体的固定相上。本发明不需要培养细胞或制备重组蛋白；可快速合成单一的、高纯的、含量稳定可控的膜蛋白；且膜蛋白在固定相上可保持天然的跨膜结构和一致的朝向；灵活的cDNA构建为药物结合位点的分析提供了可能性。本发明可应用于靶向膜蛋白的先导化合物筛选和平衡解离常数测定，为膜蛋白固定化亲和生物色谱或其他生物固相材料的快速制备提供一种实用的方法。
主权项：1.一种原位合成膜蛋白亲和生物色谱柱，其特征在于，所述膜蛋白亲和生物色谱柱是在硅胶-脂质体载体上原位合成膜蛋白；其制备方法为：采用MPTS修饰硅胶与脂质体真空涡旋混合制备空载固定相，再将膜蛋白的cDNA和附着脂质体的硅胶同时加入cell-free表达体系中合成膜蛋白，得到膜蛋白插入式固定相；将制备好的固定相装入色谱柱中，获得原位合成膜蛋白亲和色谱柱。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军海军军医大学 一种膜蛋白原位合成亲和生物色谱柱及其制备方法和应用
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