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用于顽拗型植物的快速基因组修饰的方法 

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申请/专利权人:科沃施种子欧洲股份两合公司

摘要:本发明提供了一种用于植物基因组修饰,优选用于至少一个基因组靶序列进行的靶向修饰,以获得至少一个经修饰的细胞的方法,其中通过提供基因组修饰或编辑系统以及至少一种再生加强剂或再生加强剂的组合来实现细胞的修饰,所述再生加强剂在细胞中瞬时活化和或带有至少一种表观遗传调控化学物质。优选,借助于粒子轰击引入效应分子。此外,再生经修饰的植物细胞以获得植物,所述植物将修饰遗传给其后代。另外,提供了方法、工具、构建体和策略来有效地修饰植物细胞的基因组或植物细胞中的至少一个基因组靶位点,以获得所述经修饰的细胞并从经修饰的细胞再生植物组织、器官、植物或种子。最后,本发明还涉及一种从单个植物细胞再生植物组织、器官或植物的改进方法。

主权项:1.一种用于植物基因组修饰,优选用于至少一个基因组靶序列的靶向修饰,以获得至少一个经修饰的细胞的方法,其中所述方法包括以下步骤:a提供至少一个植物细胞或单个植物细胞;b将以下引入到所述至少一个植物细胞或所述单个植物细胞中:i至少一种基因组修饰系统,优选基因组编辑系统,其包含至少一种位点定向的核酸酶、切口酶或灭活核酸酶,优选核酸引导的核酸酶、切口酶或灭活核酸酶、或编码其的序列,以及任选存在的至少一种引导分子或编码其的序列;ii至少一种再生加强剂或编码其的序列和或至少一种表观遗传调控化学物质,其中所述至少一种再生加强剂在所述植物细胞中瞬时存在、瞬时活化或瞬时表达;iii以及,任选存在的至少一种修复模板或编码其的序列;以及c在允许表达和或组装和或激活所述至少一种基因组修饰系统,优选所述至少一种基因组编辑系统,以及任选存在的所述至少一种再生加强剂,以及任选存在的所述至少一种引导分子和或任选存在的所述至少一种修复模板的条件下,培养所述至少一个植物细胞或所述单个植物细胞;以及d获得至少一个经修饰的植物细胞;和或e获得从所述至少一个经修饰的细胞再生的至少一种植物组织、器官、植物或种子;以及f任选地:在携带期望的靶向修饰的T0和或T1代中筛选从所述至少一个经修饰的细胞再生的至少一种植物组织、器官、植物或种子。

全文数据:

权利要求:

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