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一种联产竹红菌甲素和竹黄胞外多糖的方法 

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申请/专利权人:杭州巴洛特生物科技有限公司

摘要:本发明属于生物工程技术领域,公开了一种联产竹红菌甲素和竹黄胞外多糖的方法,其包括如下步骤:步骤1)竹黄菌发酵培养,步骤2)竹黄菌诱导培养,步骤3)分离胞外多糖,步骤4)分离竹红菌甲素。本发明在竹黄菌液体发酵生产竹红菌素的同时,利用废弃物制备了竹黄多糖,实现了两种药用活性物质的联产,实现了变废为宝,提高了经济效益。

主权项:1.一种联产竹红菌甲素和竹黄胞外多糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:步骤1竹黄菌发酵培养,包括如下步骤:将竹黄菌种子液按照5-10%的接种量接种到发酵培养基中,发酵培养36-60h,温度为27℃,转速为150rpm,通气为0.6VVM;步骤2竹黄菌诱导培养,包括:往步骤1的发酵培养基中添加诱导培养基,诱导培养24-48h,温度为30℃,转速为150rpm,通气为0.7VVM;停止发酵,收集发酵液;所述诱导培养基的组分为:硝酸钙8-15gL,甲醇75-125gL;步骤3分离胞外多糖,包括:将发酵液过滤,收集滤液和菌体;将滤液减压蒸发至原体积的三分之一,然后添加2倍体积的无水乙醇,置于4℃条件下12h,然后4000rpm离心15min,收集沉淀物,再添加85%乙醇,搅拌均匀,置于4℃条件下6h,然后4000rpm离心10min,收集沉淀物,80℃烘干60min,得到胞外多糖粗提物;步骤4分离竹红菌甲素,包括:将步骤3所得菌体用蒸馏水洗涤后,再放入冷冻干燥机中冷冻干燥至恒重,往干燥后的菌体中加入二氯甲烷,二者比例为1g:10ml,30℃超声处理30min,得到提取液,将提取液经减压浓缩干燥,再用氯仿溶解,然后用体积比为2:1的氯仿-水溶剂进行萃取,获得竹红菌素粗提物,再减压浓缩至原体积的五分之一,上样硅胶柱,洗脱,收集红色洗脱液,减压浓缩至有紫红色结晶物产生,静置6h,收集结晶物,干燥。

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