买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：山西农业大学

摘要：本发明公开了食品技术领域的一种利用HPLC检测蛋黄中α‑香附酮的富集量的方法，该利用HPLC检测蛋黄中α‑香附酮的富集量的方法包括如下步骤：将煮好的鸡蛋的蛋黄与蛋清分离，准确称取蛋黄，对其进行皂化；在皂化后的样品内添加石油醚，制取石油醚提取液；在石油醚提取液中添加甲醇进行溶解，制得浓缩液，提取溶液进行过滤冷藏，待高效液相色分析；取α‑香附酮标准品溶液和浓缩液进行专属性、线性关系、精密度以及重复性试验，本发明通过高效液相色谱法可以检测到蛋黄中有α‑香附酮的富集，该方法操作简单，结果准确误差小，通过对鸡蛋进行食品加工，提高了鸡蛋的附加值，通过检测蛋黄中α‑香附酮的富集量，也为功能性鸡蛋研发提供预试验。

主权项：1.一种利用HPLC检测蛋黄中α-香附酮的富集量的方法，其特征在于：该利用HPLC检测蛋黄中α-香附酮的富集量的方法包括如下步骤：S1：溶液制备：利用甲醇对香附酮标准品进行溶解稀释，向香附酮标准品中加入少量甲醇溶剂，溶解后，用移液枪吸取置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解至刻度，即得α-香附酮标准品贮备溶液；精密量取对照品贮备溶液5mL，置50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得α-香附酮标准品溶液；S2：水煮处理：利用蒸馏水对鸡蛋进行水煮，水煮过程中添加提前泡好的香附：取一颗鸡蛋，3g炮制过的香附粉末，将鸡蛋放入烧杯中，加适量的蒸馏水，加入一定浓度的氯化钠溶液搅拌，水沸腾之后再煮10分钟，鸡蛋煮熟取出来后，过冷水之后，去掉蛋壳，拿牙签或者针，在鸡蛋表面均匀的扎一些小孔，将提前泡好的3g香附放入烧杯中加270mL的水，放入鸡蛋，煮至90mL即可；S3：皂化：将煮好的鸡蛋的蛋黄与蛋清分离，准确称取蛋黄5.0g，置于150mL、4×4宽口的棕色皂化瓶中，向皂化瓶中依次加入10％抗坏血酸溶液3mL，50％的氢氧化钾溶液5mL和30％的无水乙醇30mL，摇晃均匀后，放入70℃水浴恒温振荡器内，固定，皂化30min，打开振荡开关，为了防止鸡蛋附着在瓶壁上，要不停震荡，皂化完成后，取出皂化瓶后自然冷却或者用冷水冲洗，使瓶冷却至40℃；S4：提取：在皂化后的样品内添加石油醚，制取石油醚提取液：冷却后的样品溶液移到250mL的分液漏斗中，分3次加入60mL蒸馏水洗涤皂化瓶，并将所有液体转移到分液漏斗之后，振荡混匀，再加入50mL石油醚，轻摇分液漏斗，防止乳化，静置5分钟，待分层后，转移水相到第2个分液漏斗，再加入50mL石油醚，待分层后把水相转移到第3个分液漏斗，最后一次加入50mL石油醚静置之后弃去水相，把3次石油醚相混合，用水不停地冲洗石油醚相，用pH试纸检测水层，直到水层pH值不大于7，弃去水层，最后取适量的无水硫酸钠放于大烧杯中，接着加入石油醚提取液，用玻璃棒搅拌后，再用滤纸过滤到一个干燥的烧杯中，用锡纸密封；S5：浓缩：在石油醚提取液中添加甲醇进行溶解，制得浓缩液，提取溶液进行过滤冷藏，待进行高效液相色谱分析：把装有石油醚提取液的烧杯，放在50℃～60℃水浴上蒸发，等瓶内没有液体的时候，取下烧杯，向烧杯中加入2.0mL甲醇溶解，用取下针头的注射器吸取溶液，通过0.45μm滤膜过滤到1.5mL的棕色液相瓶里，盖上盖子，放入冰箱冷藏，待高效液相色谱分析；S6：检测试验：取α-香附酮标准品溶液和浓缩液进行专属性、线性关系、精密度以及重复性试验；取α-香附酮标品溶液一份，3种不同浓度的样品溶液各一份和一个阴性对照品溶液一份，按照试验进行的色谱条件进样测定，做试验专属性检测；准确量取标准品储备溶液0.25，0.5，1.5，2.5，3.5mL分别置于25mL容量瓶内，加入甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，得到一系列质量浓度溶液，用注射器吸取溶液，通过0.45μm有机相滤膜过滤到1.5mL的棕色进样瓶里，盖上盖子，按照试验进行的色谱条件进样测定，记录色谱图和峰面积，以质量浓度为横坐标、对应峰面积为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线；取α-香附酮标品溶液适量，按照拟订的色谱条件进样，连续测定5次，记录峰面积，做仪器的精密度检测；取6g香附试验后的样品溶液，按照相同的色谱条件，进行测定，进样5次，记录峰面积，做试验方法的重复性检测。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山西农业大学 一种利用HPLC检测蛋黄中α-香附酮的富集量的方法