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北美冬青组培快速繁殖方法及应用 

申请/专利权人:西南林业大学

申请日:2023-10-25

公开(公告)日:2023-11-24

公开(公告)号:CN117099686A

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.01.05#授权;2023.12.12#实质审查的生效;2023.11.24#公开

摘要:本发明涉及生物技术领域,具体来说是一种北美冬青组培快速繁殖方法及应用,步骤包括:外植体消毒、初代丛生芽诱导、继代丛生芽增殖和丛生芽生根。本发明消毒污染率仅为4.6%,丛生芽诱导率高达100%且不产生愈伤,增殖系数高达7.0以上,生根率提高至100%,同时可使叶片展开度降低,茎有木质化趋向,能更大程度的有利于驯化成活率的提高。

主权项:1.北美冬青组培快速繁殖方法,其特征在于,步骤包括:(1)外植体消毒:选择端部未木质化的幼嫩枝条,清洗后依次用酒精、升汞、双氧水、升汞消毒;具体为:75%酒精消毒20~30s,无菌水涮洗2~3次;0.1%升汞溶液消毒1~2min,无菌水涮洗3~4次;5%双氧水溶液消毒15~18min,无菌水涮洗2~3次;0.05%升汞溶液消毒5~6min,无菌水涮洗6~7次;(2)初代丛生芽诱导:经消毒后的外植体,接种于初代丛生芽诱导培养基中,置于温度25±2℃,每日照光12h,光强2000~3000lx的光暗交替下培养40~45天;所述初代丛生芽诱导培养基配方为:MS+NAA0.05~0.1mgL+2,4-D0.01~0.02mgL+2-iP0.3~0.5mgL+KT5.0~6.0mgL;(3)继代丛生芽增殖:初代诱导的丛生芽切成单芽,接种于丛生芽增殖培养基中,置于温度25±2℃,每日照光12h,光强2000~3000lx的光暗交替下培养30~35天;所述继代丛生芽增殖培养基配方为:改良MS+NAA0.02~0.05mgL+BR0.05~0.08mgL+KT3.0~4.0mgL+GA30.2~0.4mgL+硝酸银0.1~0.2μgL+椰乳20~30gL;(4)丛生芽生根:将继代丛生芽切成单芽,接种于生根培养基中,置于温度25±2℃,每日照光14h,光强2000~3000lx的光暗交替下培养20~25天;所述生根培养基配方为:12改良MS+NAA0.3~0.5mgL+IAA1.5~2.0mgL+椰汁50~80mLL+CH20~30mgL。

全文数据:

权利要求:

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