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一种银杏的组培繁殖方法 

申请/专利权人:鹿伦跃

申请日:2023-06-15

公开(公告)日:2024-06-25

公开(公告)号:CN116584393B

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00;A01G31/00;A01G24/15

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.25#授权;2023.09.01#实质审查的生效;2023.08.15#公开

摘要:本发明公开了一种银杏的组培繁殖方法,属于植物组织培养技术领域,包括以下步骤:步骤S1、抗褐化培养基的配制;步骤S2、银杏茎段灭菌处理;步骤S3、银杏愈伤组织及其诱导分化的培养;步骤S4、银杏幼苗的移栽。本发明通过用消毒剂A和消毒剂B代替升汞对银杏组织进行灭菌,保证灭菌效果的同时大大降低了安全隐患,其次通过在生长调节剂中引入生长素、细胞分裂素、诱导剂、分化剂和AgNO3,促进了银杏组织愈伤以及诱导分化,最后在培养过程中加入褐变抑制剂,通过引入抗氧化剂和多酚氧化酶抑制剂,再加入植物生长调节剂,大大降低了银杏茎段组织的褐化程度,提高了银杏的移栽成活率。

主权项:1.一种银杏的组培繁殖方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤S1、抗褐化培养基的配制:向MS培养基中加入蔗糖、琼脂、植物生长调节剂和褐变抑制剂混合均匀,配制完成后装于培养瓶中,在高温高压灭菌锅中灭菌,备用;步骤S2、银杏茎段灭菌处理:将银杏茎段放置于已灭菌的培养瓶中,先用消毒剂A浸泡5-30min,再用消毒剂B浸泡5-15min,再将消毒剂倒出后立即倒入事先准备好的无菌水,漂洗4-5次;步骤S3、银杏愈伤组织及其诱导分化的培养:将灭菌处理后的银杏茎段放入抗褐化培养基中,于20-22℃、光照强度2000-2200lx、湿度70-80%、光照10-12hd的条件下光照28-30天,得到不定芽和不定根;步骤S4、银杏幼苗的移栽:将得到的生根银杏幼苗从培养瓶中取出并用自来水洗去根部残留的培养基,移栽至草炭土、珍珠岩和蛭石按照3:2:1比例混合构成的混合基质中,置于营养钵内培养;步骤S1中所述蔗糖、琼脂、植物生长调节剂和褐变抑制剂的质量比为4-5:0.8-0.9:0.606-0.656:0.049-0.059;步骤S1中所述植物生长调节剂为生长素、细胞分裂素、诱导剂、分化剂和AgNO3按照用量比为3-3.2:2-2.2:500-520:100-120:1-1.2混合得到,其中,生长素为NAA,细胞分裂素为6-BA,诱导剂为Gln,分化剂为壳聚糖;步骤S1中所述褐变抑制剂为NH4NO3、KH2PO4、NH4Cl、Na2MoO4˙2H2O、H3BO3、MnSO4˙4H2O、VC和Na2S2O3按照质量比为5.5-5.7:0.56-0.6:0.1-0.12:0.0125-0.015:0.24-0.25:0.223-0.23:0.1-0.12:0.05-0.1混合得到;步骤S2中所述银杏茎段为三月下旬至五月中旬抽出的当年生梅核类银杏的上茎段和中茎段的任意一种,且银杏茎段事先置于自来水龙头下流水冲洗1-2h;步骤S2中所述消毒剂A为浓度为2%的市售次氯酸钠,消毒剂B为乙醇和双氧水以1:0.1-0.2混合制得,其中乙醇的浓度为70-75%,双氧水的浓度为10-12%。

全文数据:

权利要求:

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