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申请/专利权人：华南师范大学
申请日：2022-06-23
公开（公告）日：2023-12-22
公开（公告）号：CN115125268B
主分类号：C12N15/85
分类号：C12N15/85;C12N15/89;C12N15/12;A01K67/027
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2023.12.22#授权;2022.10.25#实质审查的生效;2022.09.30#公开
摘要：本发明公开了一种条件性诱导神经干细胞增殖的墨西哥钝口螈动物模型的构建方法及其应用。该构建方法包括如下步骤：将Yap1S96AS352A突变体SEQIDNO.1片段连接到CAGGs:LP‑EGFP‑LP‑Cherry质粒骨架上，得到重组质粒；然后将其与Tol2转座酶mRNA显微注射到墨西哥钝口螈受精卵中，经常规饲养后，再电转Cre重组酶表达质粒，利用Cre重组酶激活Yap1S96AS352A突变体表达，进而诱导神经细胞转分化为神经干细胞并增殖。本发明方法为研究其体内神经干细胞的功能，特别是再生过程中的功能提供了强有力的工具。
主权项：1.一种条件性诱导神经干细胞增殖的墨西哥钝口螈动物模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1将Yap1S96AS352A突变体片段连接到经限制性内切酶BmtI和EcoRI酶切后的CAGGs:LP-EGFP-LP-Cherry质粒骨架上，得到CAGGs:LP-EGFP-LP-Yap1S96AS352A-T2A-Cherry质粒；其中，Yap1S96AS352A突变体片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；2将CAGGs:LP-EGFP-LP-Yap1S96AS352A-T2A-Cherry质粒和Tol2转座酶mRNA显微注射到墨西哥钝口螈受精卵中，然后室温常规饲养，得到诱导性过表达Yap1突变体的动物；3将Cre重组酶表达质粒CAGGs:ER-Cre-ER-T2A-EGFP-nuc电转至诱导性过表达Yap1突变体的动物的脊髓处，继续常规饲养，以诱导Yap1S96AS352A突变体过表达，得到所述的墨西哥钝口螈动物模型；步骤2中所述的诱导性过表达Yap1突变体的动物的体长为2～2.5cm。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华南师范大学 一种条件性诱导神经干细胞增殖的墨西哥钝口螈动物模型的构建方法及其应用
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